芒果叶提取物—芒果苷联合麻黄碱对过敏性哮喘的增效减副作用分析-analysis of synergistic and side effects of mango leaf extract - mangiferin combined with ephedrine on allergic asthma.docxVIP

TAEtris/aeetate(buffer)Tris/乙酸电泳缓冲液TEMEDtetramethylenediamine四甲基乙二胺ThhelperTcell辅助性T细胞Tristris(hydroxymethyl)aminomethane三羟基氨基甲烷中文摘要目的：运用卵白蛋白(OVA)致敏和激发的方法建立过敏性哮喘小鼠模型，观察芒果叶提取物—芒果苷联合麻黄碱治疗过敏性哮喘的药效作用，并进一步探讨芒果苷联合麻黄碱对Th1/Th2型细胞基因表达的影响。方法：4~5周龄SPF级、健康BALB/c雌性小鼠110只，体重18±2g，按随机数字表法分为11组，分别为空白对照组，模型对照组，地塞米松阳性对照组(1.25mg·kg-1)，芒果苷高剂量治疗组(400mg·kg-1)，芒果苷低剂量治疗组(200mg·kg-1)，麻黄碱高剂量组(100mg·kg-1)，麻黄碱低剂量组(50mg·kg-1)，芒果苷高剂量与麻黄碱高剂量联合治疗组(400mg·kg-1+100mg·kg-1)，芒果苷低剂量与麻黄碱低剂量联合治疗组(200mg·kg-1+50mg·kg-1)，芒果苷高剂量与麻黄碱低剂量联合治疗组(400mg·kg-1+50mg·kg-1)，芒果苷低剂量与麻黄碱高剂量联合治疗组(200mg·kg-1+100mg·kg-1)，每组10只。采用OVA致敏和激发构建小鼠哮喘模型。1芒果苷联合麻黄碱治疗过敏性哮喘的药效学研究：用小鼠自主活动记录仪，连续考察14天在给药1小时后小鼠的自主活动变化；观察激发时各组小鼠哮喘发作表现；细胞涂片进行外周血中白细胞分类计数；HE染色观察肺组织病理切片炎症细胞浸润情况；采用EIA法检测小鼠血清中OVA特异性IgE（OVA-sIgE）和ELISA法检测小鼠血清中cAMP的含量。2芒果苷联合麻黄碱对Th1/Th2型细胞因子mRNA表达水平的影响研究：采用RT-PCR法检测小鼠肺组织中Th1型细胞因子IFN-γ和Th2型细胞因子IL-4、IL-5、的mRNA表达水平。3采用SPSS17.0统计软件进行分析，Homogeneity检验方差齐性。结果：1芒果苷联合麻黄碱治疗过敏性哮喘的药效学研究：各联合给药组与麻高组相比，可明显降低小鼠的自主活动力（P0.01）；与模型组、芒高组、芒低组、麻低组比较，联合给药组可明显减轻小鼠哮喘发作表现如呛咳、呼吸急促、躁动不安、腹肌收缩、紫绀等症状（P0.01）；与模型组、麻低组比较，联合给药组能明显减少全血中嗜酸性粒细胞（EOS）比例（P0.01）；与模型组、芒低组比较，联合给药组可显著升高全血中单核细胞的比例（P0.01）；与模型组、麻低组相比，芒高+麻高、芒高+麻低、芒低+麻高组可显著降低全血中中性粒细胞的比例（P0.01）；与模型组相比，芒高+麻高、芒高+麻低组可降低全血中的白细胞总数（P0.05~0.01）。与模型组、芒低组、麻低组比较，联合给药组均可不同程度的改善肺组织的病理学改变，减轻气道炎症（P0.05~0.01）；与模型组、芒低组、麻低组比较，联合给药组均可显著降低血清中OVA-sIgE含量（P0.01）；与模型组、芒低组、麻低组比较，芒高+麻高组、芒低+麻低组均可显著升高血清中cAMP含量（P0.01）。2芒果苷对Th1/Th2型细胞因子mRNA表达的影响：RT-PCR结果显示：芒低+麻高组显著降低Th2型细胞因子IL-4mRNA表达水平（P0.05）；联合给药组可降低Th2型细胞因子IL-5mRNA表达水平，但与模型组相比，无显著性差异；芒高+麻高组、芒低+麻高组可显著上调Th1型细胞因子IFN-γmRNA表达水平（P0.01）。结论：1芒果苷与麻黄碱联合用药可明显降低麻黄碱所致小鼠亢奋、震颤等副作用；可明显减轻在激发时哮喘小鼠发作表现、哮喘小鼠体内EOS浸润及OVA-sIgE含量、升高cAMP含量。改善肺组织病理学改变，减轻气道炎症，显示芒果苷与麻黄碱联合用药对治疗哮喘有显著的药效作用。2联合给药组可调节Th1/Th2型细胞因子mRNA表达，提示联合给药组治疗过敏性哮喘的免疫分子机制可能是调节Th1/Th2型细胞因子mRNA表达。关键词：哮喘；小鼠；芒果苷；麻黄碱；联合用药StudyonEnhancethecurativeeffectandReduceside-effectsofMangiferinExtractedfromMangoLeavescombinedwithEphedrineonAsthmainMiceABSTRACTObjective:Tostudythepharmacodynamicsofmangiferinextractedfrommangoleavescombinedwithephedrineonallergicasthmamodelin