芒果苷对酒精性肝损伤大鼠保护作用分析-protective effect of mangiferin on alcoholic liver injury in rats.docxVIP

3 3 中 文 摘 要 目 的：摸索理想大鼠酒精性肝损伤(alcohol-induced liver injury,ALI) 造模条件，提供可靠防治 ALI 动物模型；评价芒果苷对酒精性肝损伤保 护效果，并探讨其对肝脏乙醇代谢酶及抗氧化系统影响，为芒果苷开发 成防治 ALI 药物或保健食品提供科学的依据。 方 法： 70 只正常雄性 SD 大鼠分两批进行 ALI 造模条件研究，第一 批：40 只大鼠分为 4 个组，分别是：正常组（NS）、模型高剂量组（1-6 周 ig40%白酒，9 g/kg/d ；7-12 周 ig50%白酒，10g/kg/d）、模型中剂量 组（1-6 周 ig40%白酒，8g/kg/d ；7-12 周 ig50%白酒，9g/kg/d）、模型 低剂量组（1-6 周 ig40%白酒，7g/kg/d ；7-12 周 ig50%白酒，8g/kg/d）， 每日分两次灌胃造模，于 12 周末处死所有大鼠。第二批：30 大鼠分为 4 个组，分别是：正常组（n=12,igNS）、模型组 1、2、3（n=6,ig50% 白酒，9 g/kg/d），每日分两次灌胃造模，分别于 8、12、16 周末处死 模型 1、2、3 组大鼠，正常组 4 只大鼠，两批实验大鼠均取肝组织，进 行 HE 染色病理学观察，测定血清 ALT、AST、GGT 活力。 90 只正常雄性 SD 大鼠进行芒果苷（MGF）对 ALI 保护作用研究， 酒精性肝损伤 SD 大鼠分为 5 个组，分别为：戒断组（NS）、阳性组 （100mg/kg/d）、MGF 高剂量组（140mg/kg/d）、MGF 中剂量组 （70mg/kg/d）、MGF 低剂量组（ 35mg/kg/d），每日一次，于干预 28、 56 天后处死每组 6 只大鼠。所有大鼠均取肝称量湿重，考察肝脏指数； 观察 HE 染色病理学变化；电镜观察肝细胞超微结果改变，测定血清 ALT、AST、GGT 活力；制备 10%肝匀浆，考马斯亮蓝测定蛋白含量， 测定 ADH、ALDH、SOD、CAT、GSH-PX、GSH-ST、GR 活力，及 H2O2 、MDA 及 GSH 含量。 结 果：（1）ALI 模型造模条件研究 PAGE PAGE 4 第一批造模条件研究，模型组所有大鼠均造成酒精性脂肪肝;中剂 量组 70%大鼠出现酒精性肝炎病理变化，高剂量组 100%大鼠出现酒精 性肝炎病理变化，22.2%大鼠可见肝脏间质反应性增生。模型组三个剂 量组， ALT、AST、GGT 活性均较正常组有显著性升高（P＜0.01）； 且高剂量组三项血清酶指标升高幅度最高。 第二批造模条件研究，模型组所有大鼠均造成酒精性脂肪肝，模型 1组66.67%大鼠出现酒精性肝炎病理变化，模型3组与2组100%出现酒精 性肝炎病理变化，且有33.33%大鼠均可见肝脏间质反应性增生。模型组 三组， ALT、AST、GGT活性均较正常组有显著性升高（P＜0.01）；且 模型2与模型3三项血清酶指标升高幅度相近。 （2）芒果苷对 ALI 保护效果评价 MGF 各剂量组大鼠肝组织病理异常改变明显减轻，较戒断组肝脏 系数均显著性降低（P＜0.01），肝细胞肿胀减轻，脂肪空泡减少，肝 小叶炎症浸润有明显改善，并呈一定量效关系，干预 28 天与 56 天对病 理改变无明显差异；电镜观察显示 MGF 低剂量组的细胞损伤仍明显， 脂滴广泛存在，线粒体特征不明显，无典型粗面内质网结构，较正常组 混乱；MGF 高、中剂量组细胞质仍有脂滴分布，但线粒体数目和形态 接近正常，有正常形态的粗面内质网，整体结构有序度明显优于戒断组。 与正常组相比，模型组血清 ALT、AST、GGT 活性均显著增加（P ＜0.01）。干预 28 天与 56 天后， MGF 高中剂量与戒断组相比，三项 转氨酶活性均显著性下降（P＜0.01）；干预 56 天较干预 28 天 MGF 各 组血清三项转氨酶活性均下降,但差异无统计学意义。 （3）芒果苷对 ALI 大鼠肝脏乙醇代谢酶系统的影响 与正常组相比，模型组 ADH、ALDH 活性均显著降低（P＜0.01）。 干预 28 天或 56 天后，MGF 高中剂量组，较戒断组 ADH、ALDH 活性 均有显著性升高差异（P＜0.01），低剂量组对两项酶有不同程度升高； MGF 干预 56 天较 28 天差异无统计学意义。 （4）芒果苷对 ALI 大鼠肝细胞抗氧化系统的影响 与正常组相比，模型组肝脏 H2O2、MDA 含量均显著增加（P＜0.01）， 肝脏 SOD、CAT、GSH-Px、GSH-ST、GR 活性和 GSH 含量均显著降 低（P＜0.01）。 干预 28 天后，MGF 中剂量组能显著性降低 MDA 含量，对 GSH 含量、GR、SOD、