慢性应激抑制大鼠基底外侧杏仁核5-ht2受体介导的长时程增强-chronic stress inhibits long-term potentiation mediated by 5 - ht2 receptors in the amygdala of the lateral basal ganglia of rats.docxVIP

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2018-07-27 发布于上海
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慢性应激抑制大鼠基底外侧杏仁核5-ht2受体介导的长时程增强-chronic stress inhibits long-term potentiation mediated by 5 - ht2 receptors in the amygdala of the lateral basal ganglia of rats.docx

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慢性应激抑制大鼠基底外侧杏仁核5-ht2受体介导的长时程增强-chronic stress inhibits long-term potentiation mediated by 5 - ht2 receptors in the amygdala of the lateral basal ganglia of rats

目录中英文缩略词表……………………………………………………1中文摘要………………………………………………………………2英文摘要………………………………………………………………4前言……………………………………………………………………6材料和方法…………………………………...……………………….92.1材料92.1.1实验动物92.1.2主要仪器92.1.3主要试剂与耗材102.1.4主要溶液配方102.2方法132.2.1离体脑片海马场电位的记录方法132.2.2慢性应激模型的建立132.2.3旷场实验142.2.4水迷宫实验152.2.5westernblot分子生物学方法152.2.6统计分析与图像处理17结果…………………………..………………………………………..183.1DOI对BLA的长时程增强的调节作用183.25-HT2A/2C受体拮抗剂ritanserin作用于DOI在LTP改变.193.3慢性应激对大鼠探究行为及焦虑水平的影响203.4慢性应激对大鼠空间记忆的影响…………………….…223.5慢性应激对5-HT2A/2C受体介导的长时程增强的作用233.6慢性应激大鼠杏仁核5-HT2A和5-HT2c受体的表达….…...253.7慢性应激大鼠杏仁核PKC的表达…………………….…...26讨论……………………………………………..…………………29结论………………………………………………..…………………..33参考文献……………………………………………..……………34综述……………………………………….………………………...38致谢……………………………………….………………………...43中英文词缩略表英文缩略词英文全称中文译名5-HTACSF5-hydroxytryptamineartificialcerebrospinalfluid5羟色胺人工脑脊液BLAbasolateralamygdala基底外侧杏仁核BNSTbednucleusofthestriaterminalis终纹床核CMSchronicmildstress慢性温和应激CUMSchronicunpredictablemildstress慢性不可预知轻度应激LAlateralamygdala外侧杏仁核LTPlong-termpotentiation长时程增强LTDPKClong—termdepressionproteinkinaseC长时程抑制蛋白激酶CPTSDpost-traumaticstressdisorder创伤后应激综合征SDSPSSprague-DawleyratssingleprolongedstressSD大鼠单一连续应激STEshort-termenhancement短时程增强TBSthetaburststimulationθ频率波刺激慢性应激抑制大鼠基底外侧杏仁核5-HT2受体介导的长时程增强中文摘要目的本实验采用慢性不可逃脱电击方式建立慢性应激大鼠模型。以基底外侧杏仁核为研究的切入点，运用电生理、分子生物学以及行为学技术，探讨慢性应激模型大鼠基底外侧杏仁核5-HT2受体介导的长时程增强是否发生改变及其机制，本研究将有助于为焦虑、恐惧和创伤后应激障碍等杏仁核介导的应激所致的情绪情感异常提供新的治疗思路。方法①杏仁核脑片的制备：大鼠麻醉后快速取出脑部组织，置于低温氧气饱和的人工脑脊液中，将含有杏仁核部分的脑组织切成厚度为500μm的脑片。②脑片场电位的记录：在解剖显微镜下将刺激电极置于杏仁核的外囊上，记录微电极放置于杏仁核的基底外侧区，其尖端置于脑片表面下约200μm处。应用RM6240系统刺激外囊，并记录其场电位。③STE/LTP的诱导：应用单串θ频率波刺激（TBS）诱导突触可塑性，每串TBS刺激为20个短时间高频脉冲刺激，强度同常规刺激强度。④行为学实验：慢性应激模型：大鼠每天固定时间给予两次40min随机足底部电刺激（每分钟有15s随机时间点进行电击，电击电流0.8mA），按照上述方式持续5天。应激结束后进行旷场实验及水迷宫实验。⑤药物干预：分别在人工脑脊液中加入DOI（5-HT2受体激动剂）、ritanserin(5-HT2A/2C受体拮抗剂）等，观察5-HT2受体介导的长时程增强是否发生变化。⑥Westernblot:检测大鼠杏仁核5-HT2A、5-HT2C、PKC蛋白的表达情况。结果①正常组5-HT2受体激动剂DOI对BLA的突触可塑性有显著的易化作用（p0.05）。②5-HT2A/2C拮抗剂ritanserin能有效阻断DOI对LTP的易化作用（p0.05），提示在DOI的作用下，TBS诱导的LTP为5-HT2A/2C受体介导的。③旷场实验显示慢性应激组大鼠探究行为变少且有较明显的焦虑（p0.05），