优化方案2015高中生物_第一章第23节微生物的纯培养 微生物数量的测定ppt课件 北师大版选修.pptVIP

第2、3节　微生物的纯培养·微生物数量的测定;学习导航 1.能进行微生物的分离和培养。 2．会测定某种微生物的数量。;;2．微生物的分离步骤 包括____________、______或_____________ 三个步骤。 3．菌种纯化与保藏 分别从培养后长出的单个菌落上挑取少许细 胞，接种到斜面培养基上，置培养箱或温室中37 ℃培养24 h，斜面上菌种长好后， ________保存备用。;4．分离和纯化微生物是微生物技术的重要操作方法 一般根据微生物对_____________、pH、氧气等要求的不同，供给它们适宜的生活条件，或加入某种__________，造成只利于要分离的微生物生长，不利于其他微生物生长的环境，从而淘汰不需要的微生物，分离得到需要的微生物纯种。;(1)微生物的分离可以不经过样品的稀释(×) (2)无论是平板划线分离法还是涂布分离法均要在酒精火焰旁操作(√) (3)从单个菌落上挑取少许细胞接种到斜面培养基上培养属于微生物的分离技术(×);二、微生物数量的测定 1．测定土壤中的微生物的数量 (1)实验原理 利用________________将待测定的微生物样品按比例作一系列稀释后，吸取________某几个稀释度的菌液接种到平板上，培养一段时间后即可形成菌落，根据______________________ __________即可换算出样品的含菌数。;(2)实验步骤 ;平置;30～300;要使平板菌落计数法准确，需要掌握哪几个关键步骤？ 【提示】　严格执行无菌操作、准确稀释、定量接种。;2．平板菌落计数法 (1)计数原则：一般选择菌落数在___________ (细菌或放线菌)、__________ (霉菌)的平板进行计数。 (2)优点：能测出样品中活菌数，因此又称活菌计数法 (3)缺点：操作手续烦琐，时间较长，测定值常受各种因素的影响。;;灼烧时期;2.涂布分离法操作比较复杂，且各个细节均需保证无菌操作，应特别注意 (1)酒精灯与培养皿的距离要适宜。 (2)吸管头不要接触其他任何物体。 (3)吸管要在酒精灯火焰周围使用。 (4)无菌玻璃涂棒末端浸在盛有70%酒精的烧杯中，取出时，要让多余的酒精在烧杯中滴 尽，然后将沾有少量酒精的无菌玻璃涂棒在酒精灯火焰上引燃，注意防火。; (2012·贵州凯里一中检测)关于平板划线分离法操作正确的是(　　) A．使用已灭菌的接种环、培养皿，在操作过程中不需要再灭菌 B．打开含菌种的试管，需通过火焰灭菌，取出菌种后，需马上塞上棉塞 C．将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可 D．最后将平板倒置，放在培养箱中;【解析】　在平板划线时，已灭过菌的接种环在每次划线后，必须用灼烧灭菌法灭菌，以防杂菌污染，A错；盛有菌种的试管在打开或重新塞棉塞前，都需通过火焰灼烧灭菌，B错；在平板内划三至五条平行线后应盖上皿盖，并灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开始往第二区域划线并按此操作继续往三、四、五区域划线，C错；平板凝固后，须将平板倒放，以防皿盖上的水珠落入培养基，造成污染，D对。;【答案】　D 【名师点拨】　平板冷凝后，皿盖上会凝结水 珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。;有关平板划线分离法操作的叙述不正确的是 (　　) A．第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物 B．每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种;C．在每一区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液 D．划线结束后，灼烧接种环，能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者 解析：选C。本题考查了有关微生物纯化的实验操作，考查了实验与探究能力。在用平板划线法分离大肠杆菌的实验中，接种环取菌种前灼烧的目的是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物。;以后每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线后残留的菌种；划线结束后仍需灼烧接种环，是为了避免细菌污染环境和感染操作 者。从第二次划线开始，每次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端。;1．平板菌落计数法 (1)原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。;(2)注意事项： ①设置重复组：同一稀释度下，至少涂布3个平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性。分析结果时，需考虑重复组的结果是否相差较大，结果相差较大，意味着操作有误，需要重新实验。 ②设置对照：目的是排除实验中非测试因素对实验结果的影响，提高实验的可信度。;(3)计算公式