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人教版高中生物选修1专题2_微生物的培养与应用课题1《微生物的实验室培养》参考ppt课件(共48张)
专题2 :微生物的培养与应用;; 了解有关微生物及培养基的基础知识,进行无菌技术的操作,进行微生物的培养。;一、基础知识:; 2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方;选择培养基; 根据细胞生存所需物质的种类和数量,用人工方法模拟合成的。
合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。
优点:标准化生产,组分和含量相对固定;成本低
缺点: 缺少某些成分,不能完全满足体外细胞生长需要。 ; 天然培养基有血清、血浆、和组织提取液(如鸡胚和牛胚浸液)。
优点:营养成分丰富,培养效果好
缺点:来源受限;成分复杂,影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染;; 血清中含有:
①多种蛋白质(白蛋白、球蛋白、铁蛋白等);②多种金属离子;③激素;④促贴附物质,如纤粘蛋白、冷析球蛋白??胶原等;⑤各种生长因子;⑥转移蛋白;⑦不明成分;液体培养基:;固体培养基:菌落,菌苔;半固体培养基:;4.培养基的用途;(二)无菌技术; (1)消毒定义:
利用化学或物理方法,杀死大部份致病微生物的过程。区分为高程度消毒(High-level Disinfection)、中程度消毒(Intermediate-level Disinfection)、低程度消毒(Low-level Disinfection)三种方式。;(2)灭菌的定义:;1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min
2、巴氏消毒法:70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min
3、化学药剂消毒法:用75%酒精进行皮肤消毒;氯气消毒水源
4、紫外线消毒
……;1、灼烧灭菌; 最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌,它可以杀灭所有的生物,包括最耐热的某些微生物的休眠体,同时可以基本保持培养基的营养成分不被破坏。
有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌。为了防止杂菌,特别是空气中的杂菌污染,试管及玻璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口,通常采用棉花塞,也可采用各种金属、塑料及硅胶帽,它们只可让空气通过,而空气中的其他微生物不能通过。
而平皿是由正反两平面板互扣而成,这种器具是专为防止空气中微生物的污染而设计的。 ;分类;(3)微生物实验室培养的基本操作程序;旁栏思考;(一)制备牛肉膏蛋白胨培养基(用于培养细菌); 1.计算、称量
2.溶化
3.调pH: pH7.6
4.过滤:这一步可以省去。
5.分装:分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。
6.加塞
7.包扎; 8.灭菌:将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中,塞上棉花塞,包上牛皮纸,再放入高压蒸气灭菌锅,在压力为100kPa、温度为121℃,灭菌15~30min。将培养皿用旧报纸包裹,放入干热灭菌箱内,在160~170 ℃下灭菌2h。
9.倒平板:待培养基冷却到50 ℃左右时,在酒精灯附近倒平板。(倒平板操作见课本)2d后观察平板,无杂菌污染才可用来接种.
10.无菌检查:将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时,以检查灭菌是否彻底。;问题讨论;3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置?;(二)纯化大肠杆菌;;问题讨论; 2.在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?;问题讨论;微生物的恒温培养;微生物的恒温培养;菌种的保存;培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同;本课题知识小结;【典例解析】; 解析:不同的微生物,所需营养物质有较大差别,要针对微生物的具体情况分析。对于A、B选项,它的表达是不完整的。有的碳源只能是碳源,如二氧化碳;有的碳源可同时是氮源,如NH4HCO3;有的碳源同时是能源,如葡萄糖;有的碳源同时是氮源,也是能源,如蛋白胨。对于C选项,除水以外的无机物种类繁多,功能也多样。如二氧化碳,可作为自养型微生物的碳源;NaHCO3,可作为自养型微生物的碳源和无机盐;而NaCl则只能提供无机盐。对于D选项,无机氮源提供能量的情况还是存在的,如NH3可为硝化细菌提供能量和氮源。;例2.下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是
A.防止杂菌污染
B.消灭杂菌
C.培养基和发酵设备都必须灭菌
D.灭菌必须在接种前; 解析:灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。A说的是灭菌的目的,因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种,整个发酵过程不能混入其他微生物(杂菌),所以是正确的;B是错误的,因为灭菌的目的是防止杂菌污染,但实际操作中不可能只消灭杂菌,而是消灭全部微生物。C是正确的,因为
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