内生菌对茅苍术生长和挥发油积累的影响分析-effects of endophytic bacteria on growth and volatile oil accumulation of atractylodes lancea.docxVIP

摘要茅苍术Atractylodeslancea(Thunb.)DC.为菊科苍术属多年生草本植物。其干燥的根茎为中药苍术，是江苏省著名的道地药材。苍术主要活性部位是挥发油，主要功效为燥湿健脾，祛风散寒，明目。近年来由于野生茅苍术资源被掠夺性采挖，并且茅苍术的人工栽培有一定的难度，加之对茅苍术生态环境的人为破坏，造成茅苍术资源的枯竭，使其濒临灭绝。为了保护和开发茅苍术资源，本研究尝试从微生物和植物相互关系角度，研究内生真菌对茅苍术生长及主要活性成分挥发油的影响。本研究首先探讨了不同温度和不同浸种时间茅苍术种子发芽率以及生长的影响，并进一步检测内生真菌处理后茅苍术的生长生理指标和挥发油含量。结果表明，最佳发芽条件为：温度20℃，浸种48h；接种的四种内生真菌小菌核菌（AL3）、小克银汉霉（AL4）、AL11（未鉴定）和孔球孢霉（AL12）均提高了种子的发芽率和发芽势；AL3和AL12处理组的生物量分别比对照提高了46.9%(P0.05)和34.2%(P0.05)，AL3和AL12处理组的植株平均根数和对照相比分别提高了76.0%(P0.01)和65.8%(P0.01)，而内生真菌AL4和AL11对茅苍术的生长状态影响不显著；AL11和AL12的SOD和POD均稍高于对照；接4种菌后4种主要活性成分苍术酮、苍术醇、β-桉叶醇及苍术素的总含量均提高，并改变了各组分的相对百分含量。以茅苍术组培苗为材料，采用与内生真菌共培养技术，研究了内生真菌对茅苍术组培苗生长及其主要挥发油成分的影响。结果表明：培养4周后，接AL3的根数最多，比对照多92.7%（P0.01），并极显著地提高了生物量和平均根干质量，分别比对照高46.8%、62.9%（P0.01），AL12处理组和对照相比生物量和平均单株根干质量分别提高了11.5%、16.7%；而接AL4对茅苍术组培苗的生长影响不显著；AL3、AL4和AL12极显著提高了茅苍术叶片PAL酶活力，分别比对照提高了5.8、8.0和11.1倍（P0.01）；AL3处理组的POD，CAT和SOD三种酶活性与对照相似；而AL4处理组的3种酶活性分别比对照降低了9.1%、37.1%和9.7%，AL12处理组的3种酶活性分别比对照提高了10.4%、21.2%和9.6%；AL3、AL4和AL12都对茅苍术叶片总多酚含量有极显著影响，分别比对照提高了179.8%、86.2%和84.1%（P0.01）；接3种内生真菌都改变了挥发油中4种主要活性成分的相对百分含量。为了进一步研究内生真菌对茅苍术组培苗的生长的影响和主要活性成分积累的规律，炼苗后2年内分七个阶段对各项指标进行检测。结果表明，接内生真菌AL3和AL12均提高了成活率，分别比对照提高了46.66%和25.71%；AL12处理组的生物量和根干质量在每一个阶段均稍高于对照，而AL3则相反；AL3和AL12处理组的SOD和POD在每个阶段都有所提高；AL12处理组的HMGR酶活均高于对照，而AL3则相反；AL12处理组和对照相比，苍术酮、苍术醇及苍术素三种成分含量基本都是明显的高于对照，并且改变了茅苍术主要挥发油的相对百分含量，明显提高了苍术酮的比例而降低了β-桉叶醇比例；处理和对照的活性成分的总含量均在在第二年12月(第七期)达到最大。关键词：茅苍术，组培苗，内生真菌，种子发芽，挥发油，抗性相关酶AbstractAtractylodeslancea(Thunb.)DC.isakindofcompositeperennialherb,whoserhizome(atractylodes)isthenativemedicinalmaterialinJiangsuProvince.Essentialoilisthemainactivecomponentofatractylodes,whosefunctionistodeprivetheevilwetness,toinvigoratethespleenandtoimproveeyesight.DuetotheexhaustionofresourcesofA.lanceaandthedifficultiesofcultivation,theresourcesofA.lanceaarerare.InordertoprotectanddeveloptheresourceofA.lancea,weattempttostudytheeffectofendophyticfungalonthegrowthandessentialoilproductionofA.lancea,fromtheperspectiveoftherelationshipbetweenmicroorganismsandplantsOnthefirst,theeffectof