实验十二金黄色葡萄球菌ppt课件.pptVIP

BP平板计数方法——培养 涂布后，将平板静置10分钟，如样液不易吸收，可将平板放在36℃±1℃孵育 1 h；等样液吸收后反转平皿，倒置于培养箱，36℃±1℃培养，45 h～48 h。 典型菌落计数和确认 金黄色葡萄球菌在Baird－Parker平板上，菌落直径为2mm～3mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混浊带，在其外层有一透明圈。用接种针接触菌落有似奶油至树胶样的硬度 偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落；但无混浊带及透明圈。 长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落比典型菌落所产生的黑色较淡些，外观可能粗糙并干燥。 典型菌落计数和确认 选择菌落数在20 cfu～200 cfu之间平板上的典型菌落计数 最低稀释度平板的菌落小于20 cfu，计数该稀释度平板上的典型菌落 某一倍稀释度平板的菌落大于200 cfu且有典型菌落，但上一倍稀释度平板上没有典型菌落，计数该级稀释度平板上的典型菌落； 典型菌落计数和确认 某一倍稀释度平板的菌落大于200 cfu且有典型菌落，且上一倍稀释度平板上有典型菌落，其平板上的菌落数不在20 cfu～200 cfu之间，计数该级稀释度平板上的典型菌落；以上按公式一计算。 平板菌落数均在20 cfu～200 cfu之间，按公式二计算。 从典型菌落中任选五个菌落（小于五个全选），分别接种到5mLBHI和营养琼脂小斜面，36℃±1℃培养18～24h。 典型菌落计数和确认 公式一：T=AB/Cd T----样品中金黄色葡萄球菌落数 A —某一稀释度典型菌落的总数 B —某一稀释度血浆凝固酶阳性的菌落数 d —某一稀释度 C —某一稀释度用于血浆凝固酶试验的菌落数 样品稀释度 10-1 10-2 典型菌落数 66，64 6，6 用于做血浆凝固酶的菌落数 5 5 血浆凝固酶阳性菌落数 4 4 T=AB/Cd T=65×4÷5÷0.1=520 典型菌落计数和确认 公式二 N=A1B1/C1+A2B2/C2/1.1d N—样品中金黄色葡萄球菌落数 A1-第一稀释度（低稀释倍数）典型菌落总数 A2--第二稀释度（高稀释倍数）典型菌落总数 B1--第一稀释度（低稀释倍数）血浆凝固酶阳性的菌落数 B2--第二稀释度（高稀释倍数）血浆凝固酶阳性的菌落数 C1--第一稀释度（低稀释倍数）用于血浆凝固酶试验的菌落数 C2--第二稀释度（高稀释倍数）用于血浆凝固酶试验的菌落数 d — 稀释因子（第一稀释度） 1.1—计算系数 样品稀释度 10-1 10-2 典型菌落数 150，160 18，16 用于做血浆凝固酶的菌落数 5 5 血浆凝固酶阳性菌落数 3 4 公式二 N=A1B1/C1+A2B2/C2/1.1d A1B1/C1=155×3÷5=93 A2B2/C2=17×4÷5=14 T=(93+14)/1.1d=127÷1.1÷0.1=970 结果报告 单位:cfu/g或cfu/mL 如T值为0，报告 ＜1× d cfu/mL（g）。  细菌耐药与抗菌药物的合理应用施光峰上海复旦大学人寿保险基本法宣导部经理基本法课标研教材是集体备课的主要内容是高效课堂的基础高校基建管理相关法规培训七年级生物下册第七章第一节分析人类活动破坏生态环境的实例期权定价与动态无套利 细菌耐药与抗菌药物的合理应用施光峰上海复旦大学人寿保险基本法宣导部经理基本法课标研教材是集体备课的主要内容是高效课堂的基础高校基建管理相关法规培训七年级生物下册第七章第一节分析人类活动破坏生态环境的实例期权定价与动态无套利 细菌耐药与抗菌药物的合理应用施光峰上海复旦大学人寿保险基本法宣导部经理基本法课标研教材是集体备课的主要内容是高效课堂的基础高校基建管理相关法规培训七年级生物下册第七章第一节分析人类活动破坏生态环境的实例期权定价与动态无套利 实验十二 金黄色葡萄球菌检测 GB4789.10-2010 一、实验目的 学习了解金黄色葡萄球菌的生物学特性 学习掌握金黄色葡萄球菌的分离、鉴定方法及原理 二、实验原理 金黄色葡萄球菌属于微球菌科葡萄球菌属，可产生肠毒素，人误食了含有毒素的食品，就会发生食品中毒，因此，由该菌引起的中毒为毒素型食物中毒。 生化特性 典型的金葡菌呈球形，大小0.5×1.0μm。致病性菌较非致病性菌小。在液体培养基中生长，常呈双球菌或短链状排列。 本菌无鞭毛及芽孢，一般不形成荚膜。革兰氏染色阳性。 金葡菌耐盐性强，最适宜生长的盐浓度为5%～7.5%,可利用此特性对金葡菌增菌，抑制杂菌。 可产生溶血素，在血平板生生长菌落周围有透明溶血环。 可产生卵磷脂酶，分解卵磷脂，产生甘油脂和可溶性磷酸胆碱。 致病性金葡菌可产生血浆凝固酶。 金葡菌镜下特征 操作流程 检样25g(mL) +稀释液225mL，均质 血浆凝固酶试验 7.5%