桑树转景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶基因msbpase的研究-study on msb pase gene of mulberry transgenic sedum alfredii - 1,7 - diphosphatase.docxVIP

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桑树转景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶基因msbpase的研究-study on msb pase gene of mulberry transgenic sedum alfredii - 1,7 - diphosphatase

桑树转景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶基因(MSBPase)的研究+6-BA2.00mg/L+2,4-D0.10mg/L,themulberryvalue-addedcoefficientof4.6andthegrowthheightis4.8cmonthe30thday.2Factorsthataffectleafregenerationbyorthogonaltest,leafbrowninginhibitorswerescreened,andusingthesingle-factortesttodeterminetherootingmediumofmulberry,testresultsshowedthat:Theeffectofmulberryvariety,leafposition,hormonecombinationoncallusinductionrateofleafweresignificantlevels:ThemeritsoftheorderofthetestedvarietiesofXINSANG11NONGSANG14XINSANG13GUISANGYOU12;The6thleafcallusinductionrateisbetterthantheotherleaves;ThebestmediumforcallusinductionMS+6-BA1.00mg/L+2,4-D0.80mg/LisgettedwithDuncans’multiplecomparisons;XINSANG11Leafcallusinductionrateis95%.InthedifferentiationmediumMS+6-BA3.0mg/L+IAA0.1mg/L,theXINSANG11ofadventitiousbudsrateisupto87%,theaverageshootnumberisupto5.47;AdditionalPVP2.0g/L,thelowestrateofleafbrowningis3%;XINSANG11rootnumberisupto5.86inrootingmedium1/2MS+NAA0.2mg/L.3Withleavesastissueculture‘XINSANG-11’asexplant,Singlefactortesttodeterminethegenetictransformationoftheconcentrationofthebestinfection,infectiontime,atotalculturetime,kanscreeningconcentration,cefinhibitoryconcentrationcombinations..Themulberryleafdisctransformationsystemwasestablishedatlast,experimentsshowthat:thebestconcentrationofbacteriuminfectionisOD600=0.3;thetimethat10mins’infectedofmulberryleavesdrivetobeappropriate;co-cultured2dwasthemostbeneficialtransformation;tofirstscreeningis20mg/L,theconcentrationofKaninsecondaryscreeningis30mg/L,add400mg/LofCefforinhibitionatthesametime,willnotonlygetahighertransformationfrequencyofshootregeneration,butalsoabetterinhibitoryeffect.Thistransformationsystemconversionefficiencyis10%.4PolyacrylamidegelelectrophoresisshowedthatMSBPasegenehasbeenimportedintothemulberry,mulberrygenetransferofMSBPaseinitialsuccess.Keywords:Mulberry;TissueCultures;Agrobacteriumtumefaciens;MSBPaseGeneTransformation;英文缩写说明英文缩写英文名称中文说明2,4-D6-BACef2,4-Dichlorophenoxyaceticacid6-BenzylaminoPurineCefradine2,4-二氯苯氧乙酸6-苄氨基腺嘌呤头孢拉定CTABCe

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