肉桂醛与柠檬醛抗hl-60细胞生长效果及机理比较研究-comparative study on the growth effect and mechanism of cinnamaldehyde and citral against hl - 60 cells.docxVIP

I I 摘要 众所周知，白血病属造血系统恶性肿瘤，为国内十大高发性肿瘤病之一，而且发 病率呈逐年增加趋势。因此，深入开展对白血病致病机制研究开发新型、高效、低毒 和价廉的药物，不仅是从事相关专业研究人员的责任，而且是关系到儿童、青少年健 康和家庭幸福的大事。 西药治疗血癌有化疗、放疗和血液干细胞移植三类途径，其中以化疗为主。化疗 或放疗使患者带来痛苦，而输液或换血又存在诸多安全隐患。与之相比，中药对白血 病保守治疗有着独特的优点，不仅资源丰富，疗效独特，而且毒副作用小、安全隐患 小，同时作用途径较多，若长期服用中药还有保护和促进骨髓造血系统功能提高的作 用。目前，采用纯中药医治白血病堪为上策，故为寻找抗血癌中药提供新的思路及方 法已成为必然趋势。与柠檬醛抗 HL-60 细胞病相比，该项研究的成果不仅发现肉桂 醛有较好的选择性，用量少，效果好，毒性低，而且展现出较好临床前期试验和开发 情景，还发现该醛只有反式单体，有较简易的生物学制备方法及初步明确的抗 HL-60 细胞的作用机理，能为合成提供可行性。 采用方法 （1）苯甲醛和乙醛在弱酸性条件下合成反式肉桂醛。 （2）用台盼蓝拒染法测定 HL-60 细胞的生长曲线，跟踪两种醛对 HL-60 细胞作用过 程； （3）噻唑蓝（MTT）法检测肉桂醛和柠檬醛不同剂量和作用时间对 HL-60 细胞生长 的影响并比较两种天然产物作用的效果； （4）应用 AO/EB 染色、扫描电镜形态观察法、透射电镜形态观察法来观察亚细胞形 态学变化，揭示 HL-60 细胞受两种醛作用所发生的单细胞水平的变化规律； （5）应用流式细胞仪测试肉桂醛和柠檬醛对 HL-60 细胞凋亡率、线粒体膜电位的影 响、细胞内 ROS 的产生量，阐述 HL-60 细胞受两种醛作用代谢所发生的变化； 结果 肉桂醛和柠檬醛均具有抑制 HL-60 细胞生长和诱导凋亡的生物学效应，而前者 选择性较后者好，发现肉桂醛低浓度即可通过损伤细胞膜进入细胞使线粒体耗氧率上 升；能诱发细胞凋亡，有效抑制 HL-60 细胞的生长；通过对 ROS 的测定，虽然对细 胞凋亡过程与后者类似，但前者是通过使细胞呈空泡性散落，导致核是收缩性凋亡， 其次药物剂量是同等凋亡但前者用量较后者少，排除了细胞的炎症发生，从而实现从 II II 单细胞及亚细胞水平实时、在位、无扰状态阐析反式肉桂醛抗 HL-60 细胞的作用机 理，为临床应用提供了初步理论依据和技术参数。 关键词：肉桂醛，柠檬醛，HL-60 细胞，生长抑制，细胞凋亡 PAGE PAGE IV Abstract As we all know, leukemia is a hematopoietic malignancies, for the domestic one of the top ten high-issued tumor disease, and the incidence rate showed an increasing trend year by year. Therefore depth research on the pathogenesis of leukemia and development of new, high efficiency, low toxicity, and inexpensive drug, is not only related to professional researchers engaged in the most urgent task, and is related to the child and adolescent health event and family happiness event. Western treatment of leukemia commonly used chemotherapy, radiation therapy and blood stem cell transplantation, but the chemotherapeutic is major. Chemotherapy or radiation therapy to patients with pain, and transfusion or exchange transfusion but also there are many security risks. In contrast, the conservative Chinese medicine treatment of leukemia has unique advantages, not only rich in resources, unique effect, and drug