鞣花酸抗鼻咽癌cne-2细胞的作用及分子机制初探-preliminary study on the effect and molecular mechanism of ellagic acid on nasopharyngeal carcinoma cne - 2 cells.docxVIP

I I 目 录 鞣花酸抗鼻咽癌 CNE-2 细胞的作用及分子机制初探 中文摘要………………………………………………………………………Ⅱ ABSTRACT……………………………………………………………………Ⅲ 英汉缩略词对照表…………………………………………………………Ⅵ 前言……………………………………………………………………………1 1 材料与方法…………………………………………………………………4 1.1 实验材料与仪器……………………………………………………………4 1.2 实验方法 ……………………………………………………………………6 2 结果 … … ……… … …… …… … …… … …… …… … …… … ……… 14 3 讨论…………………………………………………………………………18 4 结论…………………………………………………………………………21 参 考 文 献 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 22 综述…………………………………………………………………………… 28 攻读学位期间发表的学术论文目录………………………………………… 40 致谢…………………………………………………………………………… 41 II II 鞣花酸抗鼻咽癌 CNE-2 细胞的作用及分子机制初探 中 文 摘 要 目的：研究五倍子提取物鞣花酸对鼻咽癌 CNE-2 细胞增殖和凋亡的影 响，探讨鞣花酸抗鼻咽癌的生物学作用及其可能的机制。 方法：培养鼻咽癌 CNE-2 细胞 24 h 后，设为 4 组实验组，3 组药物组 分别加入（2、4、6 mg/l）的鞣花酸干预，对照组（即 0 mg/l）不干预。 1. 鞣花酸干预 48h 后，显微镜下与对照组比较观察鞣花酸对鼻咽癌 CNE-2 细胞的形态的变化。2. 鞣花酸干预 48h 后,Hoechst33258 法染色，与对照 组比较观察鞣花酸对鼻咽癌 CNE-2 细胞凋亡的作用。3. 分别于鞣花酸干预 24h、48h、72h 后，MTT 实验分析，与对照组相比鞣花酸对鼻咽癌 CNE-2 细 胞增殖的影响。4. 鞣花酸干预 48h 后，流式细胞仪分析，与对照组比较鞣 花酸对鼻咽癌 CNE-2 细 胞 凋 亡 率 的 影 响 。 5. 鞣花酸 干预 48h 后， Western-blot 检测，与对照组相比鞣花酸对鼻咽癌 CNE-2 细胞中 COX-2、 NF-κB 的表达的影响。 结果：1. 浓度为 (0、2、4、6mg/l)的鞣花酸干预鼻咽癌 CNE-2 细胞后， 随药物浓度的增大，漂浮的死亡细胞数量随之增加。鼻咽癌 CNE-2 活细胞 数量随药物浓度的增大而明显减少。2. Hoechst33258 染色后，随药物浓度 的增大，鼻咽癌 CNE-2 染色细胞减少，而细胞核浓缩、核破裂的数量随药 物浓度的增大而增多。3. MTT 法检测，随药物浓度的增加，鼻咽癌 CNE-2 PAGE PAGE VI 细胞明显的生长抑制现象随之增加，呈浓度依赖性。 3. 流式细胞术结果显 示：鞣花酸处理鼻咽癌 CNE-2 细胞 48h 后，药物组(2、4、6 mg/l)凋亡率分 别为: (19. 17% ±0.91%、38. 44% ±3. 13%、61. 74% ±4.28%)，与对照 组（0. 21% ±0.08 %）相比，药物组凋亡现象明显(P0.05),药物组之间两 两比较差异明显，药物浓度越高，凋亡越明显(P0.05)。3. Western-blot 检 测结果：各药物组 COX-2、NF-κB 与对照组的比较均表达降低，浓度越高， 表达越低。 结论：鞣花酸能抑制鼻咽癌 CNE-2 细胞的增殖，诱导其凋亡；其机制 可能与抑制 COX-2 和 NF-κB 的表达有关。 关键词：鞣花酸；鼻咽癌；细胞增殖；细胞凋亡 Effect of ellagic acid on nasopharyngeal carcinoma CNE-2 cells and investigation of the molecular mechanism ABSTRACT Objective: To study the proliferation inhibition and apoptosis induction effect of ellagic acid on nasopharyngeal carcinoma CNE-2 cells. The purpose of this research was to find out the effects and mechanism of EA on na