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呼吸道感染的微生物检验 课件
如何提高呼吸道感染的病原学诊断;呼吸道感染(RTI);什么是呼吸道感染;合理的诊断;初诊
患者的主要症状是咳嗽、咳痰、高热、胸痛,可伴有呼吸异常、咯血;治疗原则;病人的分组和经验治疗;病原特异性治疗 参考09年CLSI抗菌药物敏感性试验标准;病原特异性治疗(续);细菌室做药敏试验的几点原则;如何提高诊断水平;如何提高诊断水平;正确的采集方法;;呼吸道标本运送;血培养;;二、微生物室应当重视下呼吸道标本的标准化操作。; ;;2.下呼吸道标本的细菌培养:
(1)标本培养前处理:不含或含黏液很少的合格标本,可直接接种。遇到含有大量黏液的标本,应加入等量的sputosol(一种商品化的痰液溶解剂),作用20min溶解黏液,使痰液均质化后接种。
均质化的目的:一般情况下病原菌感染肺部其部位在下呼吸道深部,炎性渗出物为了把炎症局限就将病原菌包裹在其中,若直接接种于培养基上,包裹物中的细菌很难突破包裹在培养基上生长,而痰的均质化有助于痰核内部细菌暴露,以提高阳性检出率。
(2)分离培养:将处理后的痰液接种于血琼脂平板、含抗生素的巧克力琼脂平板、沙氏板、麦康凯琼脂平板,接种后放置在5%~10%CO2孵育箱中,35℃培养18~24h,并根据菌落及形态特点做出初步判断并进行纯培养或上细菌自动鉴定仪。如24h无细菌生长应再放置24h,再观察菌落生长情况,如仍无生长才报告48小时无致病菌生长。
(3)痰半定量:即用接种环将痰液在血平板和巧克力平板上按规定的划线要求作三区划线方式接种标本进行培养。三区划线方法:首先用无菌棉签蘸取经sputosol溶解的痰液(或将接种环通过火焰灭菌,冷却后挑取少许标本,尽量挑取有脓或血的部位),然后将其涂布在平板的第一区,并做数次划线,再在二、三区依次用接种环划线,每划一区,应将接种环烧灼一次,待冷却后再划下一区。
第一区
第二区
第三区;;表2. 上呼吸道存在的正常菌群
正常菌群 正常菌群
链球菌 棒状杆菌 嗜血杆菌 厌氧球菌
微球菌 类杆菌 凝固酶阴性葡萄球菌
奈瑟菌 梭杆菌
表3 上呼吸道感染的常见病原体
种类 革兰染色阳性 革兰染色阴性
球菌 金葡、凝固酶阴性葡、化链、肺链 脑膜炎奈瑟菌
杆菌 结核分枝杆菌、白喉棒状杆菌、厌氧菌 肺克、大肠埃希菌、类杆菌、流感嗜血杆
麻风分枝杆菌、炭疽芽孢杆菌 菌、不动杆菌、肠杆菌、军团菌、百日咳
鲍特菌、铜绿假单胞菌、肺炎衣原体
真菌及其他 假丝酵母菌、放线菌、梭状杆菌、奋森螺旋体
表4 下呼吸道感染常见病原菌
种类 革兰染色阳性
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