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放射性碘标记
在RIA 中,标记抗原质量的优劣,直接影响测定结果,必须制备比放射性强、纯度高的标记抗原,并保持免疫活
性不受丧失。
一、同位素的选择
同位素有稳定性和放射性两种。放射性同位素可利用其衰变时放出的放射线进行测量,这种测量较灵敏而方便,
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故多用放射性同位素。标记抗原,常用的放射性同位素有 H、 C、 I和 I等。在使用上各有其优缺点,可根据所
进行的放射免疫分析的类型特点,标记物制备和供应情况以及实验室设备条件等作适当的选择(表8-1)。大多数抗原
14 3 14 3
分子中都含有C、H 等原子,所以用 C 或 H 标记不改变抗原的结构及其免疫学活性,且 C、 H 半衰期长,所标记
14 3
的抗原长时间放置后仍可使用,这都是其优点。 C或 H 标记的不足之处是操作较繁琐,并难以获得高比放射性的标
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记物; H 及 C 放出的都是弱β射线,需用较昂贵的液体闪烁计数器方能获得较高效率的测量,且测定操作也较麻烦。
3 14
但某些抗原用放射性碘标记容易丧失免疫化学或生物学活性者,则仍以采用 H 或 C标记物为佳。
表8-1 标记抗原常用的放射性同位素及其性质
射线种类及能量(百万电子伏特)
放射性元素 半衰期
β γ
14C 5720 年 0.155 -
3H 12.5 年 0.0189 -
125I 60 天 - 0.035
131I 8.05 天 0.608,0.335,0.250 0.364,0.637,0.722
大多数抗原分子中是不含碘的,引入碘原子就改变了抗原的分子结构,往往容易损伤抗原的免疫化学活性;且放射
性碘的半衰期较短,标记物放置后因衰变使放射性降低,因而需要经常制备标记物或要求能定期提供放射性碘标记都
能适用,放射性碘放出γ—射线,用一般晶体闪烁计数器就能获得较高效率而精确的测量,测量操作也很简单。由于这
些突出的优点,目前在放射免疫分析中,使用放射性碘标记物最多。
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从应用角度来看, I和 I 又各有其优缺点,可根据实验的要求、仪器的条件和放射性碘制剂的规格等条件合理
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选用。但相对而言, I有较多的优点,一是半衰期适中,允许标记化合物的商品化及贮存应用一段时间;二是它只发
射28keV 能量的X射线和35keV 能量的γ射线,而无β粒子,因而辐射自分解少,标记化合物有足够的稳定性。放射性
碘适用于放射免疫分析许多对象(包括蛋白质、肽类、固醇类、核酸类以及环型核苷酸衍生物等)的标记,且操作简
单,一般实验室都不难做到。
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