用于基因克隆的载体ppt课件.ppt

基因工程课程内容;第二章 分子克隆单元操作;基因工程基本流程;2.1 用于基因克隆的载体;一、载体的基本概念;2、载体应具备的条件;3、载体类型;3、载体类型;早期发现的大肠杆菌-枯草杆菌穿梭质粒载体 大肠杆菌-酿酒酵母穿梭质粒载体 大肠杆菌-牛乳头瘤病毒 迄今还没有发展出适用的大肠杆菌-植物细胞穿梭载体。 ;;3、载体类型;二、质粒(plasmid);（一）质粒的生物学特性;1、质粒的自主复制性; DNA的复制是由固定的起始点开始的。一般把生物体的复制单 位称为复制子（replicon）。一个复制子只含一个复制起点。 细菌、病毒和线粒体的DNA分子都是作为单个复制子完成复制 的，而真核生物基因组可以同时在多个复制起点上进行双向复 制，也就是说它们的基因组包含有多个复制子。 ;质粒的复制调控：调控区紧邻ori，方便构建 调控区编码RNAI（反义）和Rop蛋白，抑制复制引物RNAII与模板结合;调控区编码抑制蛋白Cop，控制复制起始因子与复制起始位点（ori）的结合;根据质粒复制调控的严密程度，质粒可分为两大复制类型：;2、质粒的不相容性;质粒的不相容性的分子机制;3、质粒的可转移性;;4、携带特殊的遗传标记;天然质粒的改造;选择性标记：供重组子筛选用的遗传标记基因 ;质粒载体的特点：;（二）质粒载体的类型;（三）重要的大肠杆菌质粒载体;pBR322质粒载体的优点： 1、具有