男性不育实验诊断方法及临床应用ppt课件.ppt

男性不育症实验诊断方法及临床应用;一、男性不育症实验诊断基础 ;1.男性不育症实验诊断概况; 男性不育症诊疗基本程序（WHO）： 不育男性 病因学诊断 治疗或偿试治疗 男科学 考虑ART助孕 选择最适ART助孕方式 辅助生殖技术;男性不育症诊疗标准化;男性不育症实验诊断标准化的意义;男性不育症实验诊断标准化的内容;男性不育症现代实验诊断技术 精液计算机辅助分析 精子功能检测 精液免疫生化检验 细胞遗传学检查 分子生物学 尤以精液免疫生化检验发展得最快, 具有十分重要的诊断价值。;2.男性不育常用实验诊断指标 方法学及临床意义;; 生精功能评价指标： 血激素：FSH、LH、 T、PRL、E2 血清抑制素B 生殖细胞凋亡 染色体及无精子候 选基因 ;常用血激素; 血激素检测注意事项: FSH浓度水平相对稳定可靠; LH、T、PRL浓度均易产生生理波动； 应注意对抽血时间的有序把握，及注意对抽血前影响因素的控制。; 血清抑制素B  Inhibin B;; 附睾分泌功能指标:精浆中性α-葡糖苷酶;精囊分泌功能指标:精浆果糖 ; 前列腺分泌功能指标（WHO推荐） 精浆柠檬酸定量（酶法） （Seminal plasma citric acid ） 精浆酸性磷酸酶定量（PNPP法） （Seminal plasma acid phosphatase ） 精浆锌定量（5-Br-PAPS法） （Seminal plasma zinc ）; 前列腺分泌功能指标:精浆柠檬酸 临床意义: 精浆柠檬酸来自前列腺，其作用是络合钙离子，通过与钙离子结合，而调节精浆钙离子浓度，并影响射精后精液液化过程的功能。; 前列腺分泌功能指标:精浆酸性磷酸酶 临床意义： 前列腺炎患者精浆酸性磷酸酶含量降低, 前列腺肥大或早期前列腺恶性肿瘤者其含量 增高。; 前列腺分泌功能指标:精浆锌 临床意义: ① 锌缺乏可引起性腺发育不良或性腺功能 减退。 ② 锌可调节雄激素代谢，锌含量降低时可 促进睾酮转变为双氢睾酮。 ;③ 锌直接参与精子生成、成熟、激活和获 能过程。可使精子免于男女生殖道对其 潜在的损伤。锌可帮助抑制细胞膜发生 脂质过???化反应，保证精子的形态结构 和功能正常。 ④ 锌是前列腺功能指标之一，与抗细菌感 染有关。;静止性生殖道感染性检测;精液圆细胞(rouud cell)： 生殖道上皮细胞、生精细胞和白细胞 统称之。 正常精液： 圆细胞数5×106/ml; 白细胞数1×106/ml。 病体原分离培养（四步法）：;精液白细胞过氧化物酶染色(正甲苯胺法); 精液白细胞群酶免组化定量检测图谱; 精浆弹性蛋白酶研究进展 经ROC分析： 判定生殖道感染临界值(Cut-off): 290ng/ml 灵敏度：79.5% 特异性：74.4% (欧洲泌尿外科学会:Cut-off 690ng/ml) 292例不育病人，34% elastase290ng/ml； 20例正常生育者，5% elastase290ng/ml； 264例非白细胞精子症者,25% elastase290ng/ml 60例阳性者经Norfloxacine治疗后: 25%290ng/ml. ; 三种感染性检测方法比较;精子质量评价; 抗精子抗体 anti-sperm antibody (AsAb) ⑴血清AsAb检测指标的局限性 a) 男性特有的血睾屏障对精子施行封闭式保护; b) 精子抗原的复杂性给诊断试剂的制备带来困难. ⑵ 精子膜表面抗体（包被抗体）检测的意义 ① 避免精子膜内抗原释放,反应具特异性; ② 检测活力精子,更具临床意义.; 精子膜表面抗体检测的方法(WHO推荐) 混合凝集反应（mixedagglutination reaction,MAR） 特点：免疫性不育过筛试验，检测IgG型抗体。 免疫珠试验 (immunobead test, IBT) 特点：特异性较MAR更高,可进行IgG、IgA