小鼠 TNF_a Elisa试剂盒.pdf

小鼠 TNF-α定量分析酶联免疫检测试剂盒 本试剂盒仅供科研使用。用于体外定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的 TNF-α浓度。使用前请仔细 阅读说明书并检查试剂组分是否完整, 如有疑问请与北京博凌科为生物科技有限公司联系，我们将提供力所能及的 帮助。 如您有其它需求，请登录北京博凌科为生物科技有限公司网站或致电本公司。 TNF-α简介： 肿瘤坏死因子（TNF-α）是由单核细胞和巨噬细胞产生的多肽类细胞因子，在炎症反应、免疫系统的发展、细 胞程序性死亡和脂代谢中起重要的作用。其功能主要是在免疫反应中是一个多功能的调节器甚至作为一个强烈的热 原性物质刺激中性粒细胞，改变血管内皮细胞的特性，调节其它组织的代谢活性。TNF-α也可通过抑制脂蛋白脂肪 酶的活性而导致恶液病。爱泼斯坦病毒引起的B 细胞活化也可被 TNF-α所抑制。 巨噬细胞表面的淋巴因子和肉毒素也可介导包括上皮细胞、内皮细胞和肿瘤细胞等产生TNF-α。据报道干扰素 能显著提高TNF-α的分泌量。 TNF-α在关节炎和其它组织的炎症的发病机理中起重要作用。TNF-α也参与了包括哮喘、克罗恩氏病、类风湿 性关节炎、神经性疼痛、肥胖症、II型糖尿病、自身免疫病和肿瘤等疾病的发生。 检测原理: 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中小鼠TNF-α的浓度。小鼠TNF-α捕获抗体已预包被于酶标板上， 当加入标本或参考品时，其中的小鼠TNF-α会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生 物素化的抗小鼠TNF-α抗体后，抗小鼠TNF-α抗体与小鼠TNF-α接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通 过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会 与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂，若样本中存在TNF-α将 会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检 测，读其450nm处的OD值，小鼠TNF-α浓度与OD 值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值， 450 即可算出标本中TNF-α浓度。 小鼠定量分析酶联免疫检测试剂盒组成: 组分 规格 预包被板 12条 或 6条 样本分析缓冲液 1瓶5ml/3 ml 标准品稀释液 10ml/5ml 标准品 2/1支(冻干) 生物素化抗体 1瓶10ml/5ml HRP连接的酶结合物 1瓶10ml/5ml 浓缩洗涤液 20× 30ml/瓶 TMB底物 1瓶10ml/5 ml 终止液 1瓶5ml/3 ml 封板胶纸 3/2张 说明书 1份 标本收集: 1.标本的收集请按下列流程进行操作： A.细胞上清标本离心去除悬浮物后即可； B.血清标本应是自然凝固后，取上清，避免在冰箱中凝固血液； C.血浆标本，推荐用EDTA的方法收集； BeijingBLKW BiotechnologyCo.,Ltd. Tel:01052872342 blkwbio@ D.若待测样本不能及时检测，标本收集后请分装，冻存于－20℃，避免反复冻融。 2.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂； 3.标本应清澈透明，检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除； 4.请勿使用溶血，高血脂或污染的标本检测，否则结果将不准确。 注：正常小鼠血清或血浆样本请用标本缓冲液做倍比稀释后再检测。 注意事项: 1.试剂盒请保存在2～8℃。 2.浓缩洗涤液因在低温下可能有结晶，请水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。 3.若标准品复溶后，请在三天内用完。 4.底物请勿接触氧化剂和金属。 5.加样时