2_ME论文2_ME HP_β_CD 安全性评价 药代动力学 药效学 维拉帕米.doc

【关键词】2-ME HP-β-CD 安全性评价 药代动力学 药效学 维拉帕米 【英文关键词】2-ME HP-β-CD safety evaluation pharmacokinetics pharmacodynamics verapamil 2-ME论文：2-甲氧基雌二醇/羟丙基-β-环糊精注射剂的研究 【中文摘要】2-甲氧基雌二醇(2-ME)是一种雌激素的代谢产物,药理活性研究表明2-ME可以对抗血管生成并抑制肿瘤细胞增殖,具有抗肿瘤的作用。2-ME是一种水难溶性药物,在水中的溶解度非常低(约0.2μg·ml-1),其口服吸收效率低下,且无规律。增加药物的溶解度,选择一种合适的剂型,通过一定的给药途径作用于机体,以便于提高临床用药的安全性和疗效。因此本研究筛选出安全性高,对2-ME增溶效果好的羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)为辅料,制备成2-ME/HP-β-CD注射剂。首先进行了2-ME包合物的处方及制备工艺研究,对比了HP-β-CD和磺丁基-p-环糊精(SBE-β-CD)对2-ME的增溶作用,在综合考虑安全性及成本后,选择HP-β-CD为包合材料,得到优化制备工艺为：采用50%的HP-β-CD的水溶液超声法包合2-ME原料药,超声功率为450W,包合时间为5min。最后2-ME的溶解度达到33.6mmol·l-1,即10.147mg·ml-1,在水中溶解度提高4.6万倍,得到有临床应用前景的2-ME/HP-β-CD注射剂。对2-ME/HP-β-CD注射剂进行初步安全性评价,进行了急性毒性、刺激性和溶血性研究,结果显示2-ME/HP-β-CD注射剂无肾毒性、溶血性和刺激性,注射给药的安全性优于2-ME对照液组。考察了2-ME/HP-β-CD注射剂在小鼠体内的药物代谢动力学,结果表明2-ME/HP-β-CD注射剂在小鼠体内成二室模型,分布半衰期(t1/2α)为(3.084±0.12)min,消除半衰期(t1/2β)为(10.72±2.31) min,AUC0→240min为(175.4±25)μg·ml-1·min,2-ME在体内分布及消除较快。高剂量维拉帕米和2-ME联合给药后,维拉帕米增加了2-ME的AUC和MRT,而清除率(CL)下降。说明高剂量维拉帕米能对2-ME/HP-β-CD注射剂体内药物动力学特征产生影响。2-ME/HP-β-CD注射剂在家犬体内采用静脉滴注的方式给药,研究其药物代谢动力学特征,结果显示2-ME/HP-β-CD注射剂在家犬体内呈二室模型。分布半衰期(t1/2α)为(8.774±2.02)min,消除半衰期(t1/2p)为(18.36±2.04)min, AUC0→120min为(131.86±23)μg·ml-1·min,和在小鼠体内的药动学参数比较,t1/2α和t1/2β都有所延长,2-ME/HP-β-CD注射剂在家犬和小鼠体内的药动学特征有差异,人体的药动学特征可能和家犬的药动学特征更为类似,家犬的药动学特征可以为人体临床试验提供参考。如何长期维持2-ME在体内的有效血药浓度是2-ME/HP-β-CD注射剂今后研究的关键。建立了BALB/c近交系小鼠乳腺癌移植模型,以肿瘤体积变化、抑瘤率的计算和肺脏转移情况为检测指标,初步研究了2-ME/HP-β-CD注射剂的体内抗肿瘤效果。结果显示2-ME/HP-β-CD注射剂对小鼠乳腺癌有抑制作用,抑制率为20.9%-36.7%,表明2-ME体内肿瘤抑制效率差于文献报道的体外细胞实验结果,其原因有待深入研究。以鼠乳腺癌4T1、人肺腺癌细胞株SPC-A1、人前列腺癌PC-3为研究对象,通过体外细胞实验,采用SRB法考察2-ME和2-ME/HP-p-CD注射剂对三种肿瘤细胞的生长抑制作用,同时考察维拉帕米(verapamil)对三种肿瘤细胞的生长抑制作用,利用IC50的变化和协同指数探讨对2-ME抗癌作用的影响。证实2-ME/HP-β-CD注射剂和2-ME具有同样的体外抗肿瘤作用,钙拮抗剂维拉帕米能增强2-ME和2-ME/HP-β-CD注射剂对肿瘤细胞的抗癌活性,其增效机制可能与影响P-糖蛋白(P-gp)的外排功能有关,也可能和其他分子生物机制有关,有待于从分子生物水平继续深入研究。 【英文摘要】2-methoxyestradiol (2-ME) is a metabolite of estrogen, and pharmacological studies have shown efficacy against angiogenesis, inhibition toward tumor cell proliferation and anti-tumor effects.2-ME is a dru