嗜酸乳杆菌jq-1胞壁蛋白酶的分离纯化及其水解酪蛋白产ace抑制肽的分析-isolation and purification of lactobacillus acidophilus jq - 1 cell wall protease and analysis of ace inhibitory peptide produced by casein hydrolysis.docxVIP

嗜酸乳杆菌JQ-1胞壁蛋白酶的分离纯化及其水解酪蛋白产ACE抑制肽的研究摘要研究发现，嗜酸乳杆菌发酵酪蛋白所制备的水解产物具有降血压的功能，主要是由于乳杆菌的蛋白水解系统能分解酪蛋白产生活性多肽，这些多肽大都具有抑制血管紧张素转移酶(AngiotensinI-ConvertingEnzyme，ACE)作用，从而达到降血压等效果。本文就嗜酸乳杆菌JQ-1产胞壁蛋白酶的培养及发酵条件进行优化，并进行分离纯化，水解酪蛋白条件优化，及其水解对于酪蛋白结构及功能特性的影响进行了研究。通过正交试验确定了嗜酸乳杆菌JQ-1产胞壁蛋白酶的最优培养条件：含2%葡萄糖和1%牛肉蛋白胨的MRS改良培养基。通过单因素试验和响应面分析法确定了嗜酸乳杆菌产胞壁蛋白酶的最佳发酵条件：初始pH值8.0、发酵温度37℃、发酵时间20h。验证试验结果表明响应面分析法对优化产酶条件是可行的。采用溶菌酶结合非离子表面活性剂法对胞壁蛋白酶进行提取，得出其最佳提取条件为：菌粉与裂解液比例为1：5，33℃下保温4.0h，离心取得的上清液即为粗酶液。通过聚乙二醇-20000浓缩，DEAE-SephadexA-25和SephadexG-100两步层析对粗酶液进行分离纯化，蛋白酶提纯倍数达到50.951倍，最后回收率为12.569%，且SDS检测蛋白酶为单体结构，分子量为45kD。用纯化后CEP水解β-酪蛋白，水解液ACE抑制率为4