二章节药物分析方分析化学部分.ppt

三个基本过程 发射光谱 吸收光谱 紫外-可见分光光度特点 一、基本原理和概念 若用一连续的电磁辐射照射样品分子，将照射前后的光强度变化转变为电信号并记录下来，就可得到光强度变化对波长的关系曲线，即为分子吸收光谱 1.吸收光谱的有关术语 生色团：使化合物在紫外-可见光区产生吸收的基团 有机化合物：具有不饱和键和未成对电子的基团 具n 电子和π电子的基团 产生n→ π*跃迁和π→ π*跃迁 跃迁E较低 例： C＝C；C＝O；C＝N；—N＝N— 1）Lambert-Beer定律的适用条件（前提） 入射光为单色光 溶液是稀溶液 2）该定律适用于固体、液体和气体样品 3）在同一波长下，各组分吸光度具有加和性 应用：多组分测定 二.紫外-可见分光光度法的应用 1）对比吸收光谱特征数据 λmax 2）对比吸光度的比值 3）对比吸收光谱的一致性 在符合朗伯特-比尔定律的范围内，溶液的浓度、最大吸收波长、吸光度三者的关系是（ ） A. 增加、增加、增加 B. 减小、不变、减小 C. 减小、增加、减小 D. 增加、不变、减小 称取维生素C 0.0500 g溶于100 mL的5 mol/L硫酸溶液中，准确量取此溶液2.00 mL稀释至100 mL，取此溶液于1 cm吸收池中，在λmax＝245 nm处测得A值为0.498。求样品中维生素C 的百分质量分数。 注：当出现几个生色团共轭，则几个发色团所产生的 吸收带将消失，代之出现新的共轭吸收带，其波 长将比单个发色团的吸收波长长，强度也增强 助色团：本身无紫外吸收，但可以使生色团吸收 峰加强同时使吸收峰长移的基团 有机物：连有杂原子的饱和基团 例：—OH，—OR，—NH—，—NR2—，—X 2.光的吸收定律—朗伯－比尔定律 I0：入射光强度 I：透过光强度 c ：溶液的浓度 b：液层宽度 T－透光率（透射比） A－吸光度 朗伯—比尔定律 单色光辐射穿过被测物质溶液时，在一定的波长范围内被该物质吸收光的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度）成正比 A=ECL E: -百分吸收系数 当物质的浓度为1%（g/ml),溶液厚度1cm时的吸光度数值。 ε-摩尔吸收系数 当物质的浓度为1mol/l,溶液厚度1cm时的吸光度数值。 1.定性鉴别 A1 A2 = E1Cl E2Cl = E1 E2 长春中医药大学 1）吸收系数法 CX= CX ——供试品溶液的浓度 g/ml AX ——供试品溶液的吸光度 ——供试品中被测成分的百分吸收系数 100 ——浓度换算因数 AX ×100 2.定量分析方法 校正（标准）曲线法 参比 标准样品 待测样品 回归直线方程：A=KC+B CX= ×CR CX ——供试品溶液的浓度 AX ——供试品溶液的吸光度 CR ——对照品溶液的浓度 AX ——供试品溶液的吸光度 AX AR 对照品法 在同样条件下配制标准溶液和试样溶液， 在选定波长处，分别测定吸光度 AX=E CXL AR=E CRL 紫外-可见分光光度注意事项 1.吸收度：0.2~0.7 2.入射光波长的选择 测量的入射光波长：最大吸收波长λmax。 若干扰物在λmax处也有吸收，在干扰最小的条件下选择吸光度最大的波长长。 3. 对溶剂的要求： 以空气为空白 220~240nm, ≯0.40 241~250nm, ≯0.20 251~300nm, ≯0.10 300nm以上, ≯0.05 4、参比溶液的选择 I0 参比 样品 未考虑吸收池和溶剂对光子的作用 原则:使试液的吸光度能真正反映待测物的浓度。 利用空白试验来消除因溶剂或器皿对入射光反射和吸收带来的误差。 符合朗伯特-比耳定律的有色溶液稀释时，其最大吸收峰的波长位置（ ） A. 向短波方向移动 B. 向长波方向移动 C. 不移动，且吸光度值降低 D. 不移动，且吸光度值升高 精密称取VB12对照品20.0 mg