解淀粉芽孢杆菌LX―J1及其菌肥防治花生白绢病效果研究.docVIP

解淀粉芽孢杆菌LX―J1及其菌肥防治花生白绢病效果研究 　　摘要：研究了解淀粉芽孢杆菌LX-J1及其复合微生物肥料对花生白绢病的防治效果和对花生苗期生长的影响。采用平板对峙法，测定了LX-J1对强致病性花生白绢病菌的拮抗效果；在温室盆栽条件下，用LX-J1发酵原液及其复合微生物肥料处理了接种花生白绢病菌的培养基质，并测定了二者对白绢病菌的防效及苗期花生生长的影响。结果表明：LX-J1抑制白绢病菌菌丝生长，共培养第4d的抑菌率为75.6%；培养30d时，LX-J1菌肥处理菌核数量比对照减少了63.7%，恒重降低了60.2%；LX-J1及其菌肥300倍稀释处理基质对花生出苗和前期生长具有良好促生作用，出苗比对照分别提前2d和4d，出苗率分别提高6.1%和18.2%；LX-J1菌肥处理对花生白绢病防效优于LX-J1，防效高达83.36%，并可促进花生植株生长，利于增产。 　　关键词：解淀粉芽孢杆菌LX-J1；复合微生物肥料；花生白绢病；防效 　　中图分类号：S435 　　文献标识码：A 文章编号2017 　　1 引言 　　花生（Arachis hypogaea）又名落花生，一年生草本植物，蝶形花科，起源于南美洲。中国是世界花生种植第一大国，2015年种植面积约462万hm2，总产量1680.5万t，均占世界总产量的40%以上。在中国，花生是四大油料经济作物之一，是我国主要出口创汇的农作物之一[1]。在花生栽培中，根腐病、青枯病、白绢病等花生病害严重制约着其产量和品质[2，3]。其中白绢病在世界范围内广泛分布[4]，是一种真菌性土传病害，其无性世代病原菌为齐整小核菌（Sclerotium rolfsii Sau.），有性世代为罗氏阿太菌（Atheliarolfsii）[5，6]。该病菌寄主广，可侵染花生、白术、辣椒、油茶和桑树等多种草本作物或木本植物[7～9]，对花生产量和品质的影响逐年加重，在高温高湿地区尤为严重[10]。仅美国佐治亚州，每年花生白绢病造成当地高达3680万美元的直接经济损失[11]。在中国，山东、河南、辽宁等花生主产区深受其不同程度的危害[4，12]。 　　通常对花生白绢病的防治以化学防控为主，但化学防治过程存在成本高、防效差、农药残留等问题，缺乏科学、成套的绿色防控技术。针对白绢病通过侧链型菌核渡过不利的环境条件等发生、传染特点，采用生防菌抑制菌核萌发、菌丝生长及菌核产生，是防治花生白绢病的重要途径[13～16]。Le等[17]分离出一株对花生白绢病具有良好拮抗作用的铜绿假单胞菌（Pseudomonas），Ganesan等[18]发现根际木霉（Trichoderma）对白绢病菌具有很好的拮抗作用，陆燕等[19]研究发现解淀粉芽孢杆菌41B-1菌株可作为防治花生白绢病的生防菌。解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）在代谢过程中可产生多种抑菌的活性物质，是当前研究的热点。本研究使用的菌株LX-J1是杨娜等[20]从河南驻马店花生栽培土壤中分离得到，对多种真菌病害具有防治作用，并利用其研制出一种复合微生物肥料，实验测试了其拮抗花生白绢病菌的效果，旨在为花生白绢病的生物防治提供科学依据。 　　2 材料与方法 　　2.1 材料 　　2.1.1 植物材料 　　花生品种为冀花4号（市购）。 　　2.1.2 菌株 　　解淀粉芽孢杆菌LX-J1（保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心，保藏?为CGMCC NO.11263）由河北省农业生物技术工程技术研究中心分离并保存；花生白绢病菌菌株（齐整小核菌，Sclerotium rolfsii Sacc.）由河北省农业生物技术工程技术研究中心分离并保存。 　　2.1.3 复合微生物肥料 　　解淀粉芽孢杆菌LX-J1复合微生物肥料，其登记证号为微生物肥（2015）临字（2543）号，有效活菌数≥10亿/ml，N+P2O5+K2O=20.0%，剂型：液体。 　　2.1.4 培养基 　　牛肉膏蛋白胨培养基、PDA 固体培养基，配置参考方中达的方法[21]。 　　2.2 方法 　　2.2.1 平板对峙试验 　　从-80 ℃超低温冰箱保存的LX-J1甘油管中挑取一环，划线接种到牛肉膏蛋白胨固体培养基，30 ℃培养箱倒置培养20 h后，挑取平板上的单菌落，接种到牛肉膏蛋白胨液体培养基中，180 r/min、32 ℃摇床振荡培养18 h，备用；利用打孔器（直径=0.5 mm）在白绢病菌生长良好的平板上打孔，取菌块接种到PDA固体平板（平板直径= 9 cm，下同）培养基上，25 ℃培养3～4 d，备用。利用打孔器（直径=0.5 mm）在活化的白绢病菌平拍上打孔，取菌块接种到 P