优化方案2012高考生物总复习第一部分微生物的利用 浙科版选修1 课件.pptVIP

第一部分 微生物的利用; ;高频考点突破;②固体培养基：在液体培养基中加入凝固剂(如琼脂)，配制成的固体状态的基质，琼脂固体培养基是实验室中最常用的培养基之一。 (2)培养基配方及营养要素 基本营养要素：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐。此外还要满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。;2．无菌技术 (1)消毒和灭菌的区别;(2)无菌操作 ①对实验空间、操作台可用紫外线或酒精消毒，操作者的手用酒精消毒。 ②将实验用的培养器皿和培养基一般用高压蒸汽灭菌法灭菌，接种环用灼烧方法灭菌。 ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。;考点二;培养基灭菌 ↓ 倒平板 ↓ 接种 ↓;划线分离 ↓ 培养观察;4.保存菌种：用接种环取出单个菌落，划线法接种在斜面培养基上，37 ℃培养24 h后，4 ℃冰箱保存。 【易误警示】　①在倒平板过程???，不能将培养基溅在皿壁与皿盖上，防止杂菌污染。 ②本实验需设置空白培养基在相同条件下一起培养，以确定是否有杂菌污染。 ③培养皿倒置的目的是防止皿盖上的水珠落入培养基中，造成污染。;5．纯化大肠杆菌的方法 (1)划线分离法(方法简单易操作)：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面(也是分离纯化的方法)。在第1次划线后都从上次划线末端开始,目的是获得由单个细菌形成的标准菌落。 (2)涂布分离法(操作复杂，单菌落更易分开)：将菌液进行一系列梯度稀释，并将不同稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基上进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌的标准菌落。;考点三;3．实验步骤： (1)制平板：在酒精灯火焰旁将LB固体培养基和尿素固体培养基分别倒在两个培养皿中，超净台摇匀，平放至凝固。 (2)制备细菌悬液：将1g土样依次稀释出10～2、10～3、10～4和10～5土壤稀释液，备用。 (3)用涂布分离法分离细菌：取10～4和10～5土壤稀释液，分别加到LB培养基和尿素培养基的培养皿中，再用刮刀将菌液涂布到整个平面上。 (4)培养：将培养皿倒置，在37℃恒温培养上24～48h。 (5)观察：全营养培养基中有较多的菌落，而尿素为氮源的培养基平板中只有少量菌落。;【特别提示】　选择培养基 在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进需要的微生物的生长。目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。 在培养基中加入某种化学物质可以做到这一点，如加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。这里的加入是在培养的培养成分的基础上加入的。;培养基中的营养成分的改变也可达到分离微生物的目的。如培养基中缺乏氮源时，可以分离固氮微生物，因为非固氮微生物不能在此培养基上生存。当培养基的某种营养成分为特定化学成分时,也具有分离效果。如石油是唯一碳源时，可以抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，达到分离能消除石油污染的微生物的目的。改变微生物的培养条件， 也可以达到分离微生物的目的，如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。;命题视角剖析;(1)实验步骤： ①配置________(固体、半固体、液体)培养基，该培养基的碳源应为________。 ②将________________接入已灭菌的培养基平板上。 ③立即用适当剂量的紫外线照射，其目的是________________________________________。 ④菌落形成后，加入碘液，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小。周围出现________现象的菌落即为初选菌落。;(2)分离：将初选菌落向液体培养基中接种时应注意_________，防止细菌菌体死亡；菌体的分离可采用________法，出现____________时标志着菌落已被分离。在无菌操作下，将单菌落用接种环取出，接种到斜面上，适宜温度下培养一段时间，保存备用。;【尝试解答】　(1)①固体　玉米淀粉　②野生菌株　③(诱发野生菌株发生基因突变)对野生菌株进行诱变处理　④(透明圈)浅色范围 (2)接种环灼烧后要冷却使用　划线　不连续的单个菌落 【解析】　本题中配制培养基的目的是选择培养分解玉米淀粉的高产菌株，因此要用固体培养基。培养基的碳源为玉米淀粉。向培养基中加入适量的碘液，使培养基呈蓝色，向培养基中接种野生菌株后可用紫外线照射，诱导野生菌株发生基因突变。由于微生物可将淀粉分解使培养基褪色，因此菌落周围的培养基浅色范围大的菌落为初选菌落。;【探规寻律】　划线分离法操作的注意事项 (1)每一次划线之前都要对接种环灼烧灭菌。 (2)灼烧接种环之后 ，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。 (3)划线时最后一区域不要与第一区域相连。 (4)划线用力要