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赛分科技-超高压液相色谱8
特殊用途液相色谱柱
超高压液相色谱(UPLC)柱概述
赛分公司的超高压液相色谱UHPLC)填料包括硅胶基质填料、聚合物基质填料。
图1. 硅胶基质UHPLC填料电镜图
UHPLC硅胶基质填料高纯度(金属杂质10ppm)的球形颗粒,粒径有1.8和2.2 μm,孔径为120 ?。固定相的类型包括C18、C8、C4、苯基、氨基、腈基、强阴离子交换、强阳离子交换和HILIC等。所采用的单官能团化学键合技术可保证填料的高效、高选择性和高的分离与分析速度。所有的粒径小于2 μm的填料都能够耐受10,000 psi。
UHPLC聚合物基质填料是80%交联度的PS/DVB球形颗粒。它具有相当强的硬度,有无孔和有孔两种规格,粒径有1和1.8 μm。该固定相中含有苯基官能团,可与待测物发生疏水相互作用。与硅胶基质的反相填料相比,PolyRP固定相的一个显著优点是可以在极端pH(1-14)条件下使用,分离效率仅有轻微的降低。
图. UHPLC硅胶基质填料种类表1. 硅胶基质UHPLC填料参数表
固定相 粒径(μm) 孔径(?) 比表面积(m2/g) 碳载量 pH范围 GP-C18 1.8, 2.2 120 300 17.0% 2-8.5 BR-C18 1.8, 2.2 120 300 19.0% 1.5-10.5 GP-C8 1.8, 2.2 120 300 11.0% 2-8.5 GP-C4 1.8, 2.2 120 300 8.0% 2-8.5 GP-Phenyl 1.8, 2.2 120 300 11.0% 2-8.5 HP-Amino 1.8, 2.2 120 300 7.0% 2-8.5 HP-Cyano 1.8, 2.2 120 300 4.0% 2-8.5 HP-SCX 1.8, 2.2 120 300 11.0% 2-8.5 HP-SAX 1.8, 2.2 120 300 16.0% 2-8.5 HP-Silica 1.8, 2.2 120 300 0.0% 2-8.5 Polar-100 1.8, 2.2 120 300 11.0% 2-8.5
UHPLC PolyRP填料 PS/DVB颗粒:
球形, 80%
交联度
孔径:
无孔
粒径:
1.0和1.8 μm
比表
面积:
10 m2/g
固定相
结构:
苯基
分离
机理:
疏水相互作用
PS/DVB颗粒:
球形, 80%
交联度
UHPLC硅胶基质填料的特性
理论塔板高度(h)对线性流速(v)作图得到的曲线。
色谱柱,Sepax GP-C18, 2.2 μm, 4.6×50 mm)
流动相:70%甲醇/30%水温度,30°CUHPLC PolyRP填料的特性
高的选择性和分离效率与硅胶基质固定相具有不同的选择性高的柱间重现性可耐受pH 1-14优异的机械稳定性,可耐压至10,000 psi适合分离酸性、中性和碱性化合物,以及多肽和蛋白等赛分公司粒径小于2 μm的填料以及其装填得到的色谱柱既可用于常规HPLC也可用于UHPLC系统。图是混合标样分离得到的谱图。在流速0.43 mL/min的条件下,2.2 μm的Sepax GP-C18 (3.0×150 mm)色谱柱的压力为3060 psi。尽管此流速并不对应着最小的理论塔板高度,但是该色谱柱依然表现出高的选择性和分离效率。μm UHPLC色谱柱标准品测试图谱
色谱柱Sepax GP-C18, (2.2 μm, 3.0×150 mm)
流动相60%乙腈/40%水流速0.43 mL/min
检测波长254 nm
进样量: 2 μL
温度室温检测波长UV 254 nm;
进样体积5 μL
应用实例
图5. 中性和有机化合物的分离
色谱柱: Sepax GP-C18, (2.2 μm, 3.0×150 mm)
流动相: CH3CN/H2O (60/40, v/v)
流速: 0.43 mL/min
检测波长: 254 nm
进样量: 2 μL
温度: 25(C
图6. 巴比妥类药物的分离
色谱柱: Sepax GP-C18, (2.2 μm, 4.6×150 mm)
商品C18柱, 3 μm, 4.6×150 mm)
流动相: CH3CN/H2O (50/50, v/v)
流速:1.0 mL/min
检测波长: 254 nm
进样量: 3 μL
温度: 30(C
样品: 1. barbital,
2. Phenobarbital,
3. aprobarbital,
4. butabarbital,
5. mephobarbital,
6. pentobarbital,
7. secobarbital
图7. 维生素D异构体的分离
维生素D2和D3在赛分公司2.2μm Sepax
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