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- 2018-08-06 发布于贵州
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细菌简单染色与革兰氏染色课件
实验四? 细菌的简单染色与革兰氏染色;一、目的要求;二、基本原理;简单染色法是只用一种染料使细菌着色以显示其形态,简单染色不能辨别细菌细胞的构造。
革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立的。革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-)两大类,是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法所以能将细菌分为G+菌和G-菌,是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。;革兰氏阳性和阴性菌细胞壁成分比较;G-菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质,而且肽聚糖层较薄、交联度低,故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质,增加了细胞壁的通透性,使结晶紫和碘的复合物易于渗出,结果细菌就被脱色,再经蕃红复染后就成红色。
G?菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高,类脂质含量少,经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小,通透性降低,因此细菌仍保留初染时的颜色。;三、实验器材;四、实验方法及步骤;(2)晾干 让涂片自然晾干或者在酒精灯火焰上方文火烘干。
(3)固定 手执玻片一端,让菌膜朝上,通过火焰2-3次固定(以不烫手为宜)。
(4)染色 将固定过的涂片放在废液缸上的搁架上, 加复红染色1-2min。
(5)水洗 用水洗去涂片上的染色液。
(6)干燥 将洗过的涂片放在空气中晾干或用吸水纸吸干。
(7)镜检 先低倍观察,再高倍观察,并找出适当的视野后,将高倍镜转
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