五甲基槲皮素抗msg小鼠和gk大鼠肝损伤的作用分析-effect of pentamethyl quercetin on liver injury in msg mice and gk rats.docxVIP

缩略语（Abbreviation）缩写英文名中文名AMPKAMP-activatedproteinkinase腺苷酸活化蛋白激酶ALTAlanineaminotransferase谷丙转氨酶ASTAspartateaminotransferase谷草转氨酶DMSODimethylSulfoxide二甲基亚砜GAPDHGlyceraldehydephosphatedehydrogenase磷酸甘油醛脱氢酶G6paseGlucose-6-phosphatase葡萄糖-6-磷酸酶MSGMonosodiumglutamate谷氨酸钠METMetformin二甲双胍NAFLDNonalcoholicfattyliverdisease非酒精性脂肪性肝病OGTTOralglucosetolerancetest口服葡萄糖耐量实验PMQPentamethylquercetin五甲基槲皮素磷酸烯醇型丙酮酸梭化PEPCKPhosphoenolpyruvatecarboxykinaseRT-PCRReverseTranscriptionPolymeraseChainReaction酶逆转录聚合酶链反应RSZRosiglitazone罗格列酮PVPPolyvinylpyrrolidone聚乙烯吡咯烷酮TCTotalcholestrol总胆固醇TGTriglyceride甘油三酯TZDThiazolidinedione噻唑烷二酮摘要五甲基槲皮素（PMQ）是天然多甲氧基黄酮家族（PMF）的成员之一，主要存在于沙棘果和山小花的根茎中，本实验室将黄酮醇化合物槲皮素全甲基化后得到的PMQ，具有明显的药动学和药效学优势。已证实PMQ的药效学作用有：抗代谢综合征，抗炎，抗氧化，抗心肌肥厚，抗STZ诱导糖尿病等。有文献报道，槲皮素对于治疗代谢综合征肝脏病变能发挥明显的作用。然而迄今为止，还未有研究报道PMQ可以改善代谢性疾病相关肝损伤。由此，本课题成功制备了谷氨酸钠(MSG)诱导的代谢综合征小鼠模型，探讨PMQ对MSG小鼠肝损伤可能的作用。同时，在自发性非肥胖2型糖尿病GK大鼠模型上，进一步研究PMQ抗糖代谢紊乱及对肝功能的影响和相关的作用机制。OHHOOOHOHHOO槲皮素OCH3H3COOOCH3OCH3OOCH3五甲基槲皮素第一部分五甲基槲皮素抗MSG小鼠肝损伤的作用研究目的：观察五甲基槲皮素(PMQ)对谷氨酸钠(MSG)诱导的代谢综合征小鼠的抗肝损伤的作用研究。方法：2天龄新生雄性昆明种乳鼠，皮下注射MSG（3mg/g/d，10μl/g，生理盐水溶解）造模，连续7天（出生后2-8天），对照组注射等量生理盐水，每笼哺乳数为10只。3周龄时断乳分笼，5周龄时将造模动物依据体重随机分为6个组：溶剂对照组，PMQ2.5、5、10、20mg/kg，另有一组阳性药物对照组罗格列酮(ROS)5mg/kg，每组10只，灌胃给药，连续13周（至18周龄）。常规饲料喂养至18周龄，每周监测体重、进食情况。宰杀前测量各组小鼠的体重、体长、腰围，取血分别检测各组小鼠的空腹血糖、血甘油三酯（TG）、血总胆固醇（TC）、血清胰岛素、血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平。实验结束时，将上述各组小鼠处死后取肝脏，称重，计算肝脏指数；一部分肝组织制备切片通过HE染色观察其病理变化情况；一部分冻存用作肝脏内脂质TG含量检测。结果：1）与正常对照组相比，溶剂对照组出现明显的肥胖，表现为体重、腰围、Lee指数显著增加，体长明显缩短。溶剂对照组出现空腹血糖、血甘油三脂、血总胆固醇、血胰岛素水平的明显升高，显著的胰岛素抵抗。2）与正常对照组相比，溶剂对照组在18周龄出现明显的肝脏病变，表现为肝功能异常，血清ALT明显升高（由43.13IU/L上升至52.70IU/L），AST明显升高(由115.41IU/L上升至152.71IU/L)；肝脏重量显著增加；肝脏内TG含量显著升高，以及HE染色观察到肝细胞脂肪变等病理组织学改变。3）与溶剂对照组相比，PMQ5、10、20mg/kg显著降低MSG肥胖小鼠的体重，腰围，LEE指数，呈现明显的减肥作用，PMQ2.5mg/kg、ROS5mg/kg则对肥胖无改善作用。4）PMQ5、10、20mg/kg显著改善MSG肥胖小鼠的糖脂代谢，表现为显著降低空腹血糖、血TG和TC；明显改善高胰岛素血症，胰岛素抵抗。5）与溶剂对照组相比，PMQ10、20mg/kg对肝功能异常明显改善，表现为血清ALT、AST明显降低。6）PMQ各剂量组肝组织HE染色结果显示，与溶剂对照组相比，PMQ对肝脏脂肪变无明显改善；对肝脏内异常脂质TG增加也无明显抑制作用。结论：谷氨酸钠干预制备的MSG代谢综合征合并非酒精性单纯性脂肪肝小鼠的典型特征为肥胖，高血糖，高甘油三酯血症，高胆固醇血