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TMPRSS4抑制前列腺癌细胞转移机制初步研究 　　摘要：目的： 通过检测前列腺癌组织中TMPRSS4的表达情况，分析其在胃癌侵袭和转移中的主要机制，并研究它在前列腺癌的发生和发展过程中的作用及意义。方法： 利用Western blot、RT-PCR及免疫组化的方法检测前列腺癌组织以正常前列腺组织的TMPRSS4的表达，通过Transwell侵袭实验与划痕愈合法研究TMPRSS4抑制前列腺癌细胞侵袭转移的主要机制。结果： TMPRSS4mRNA以及蛋白在前列腺癌组织中的表达是明显低于正常的组织，正常组织中、高表达占大部分，差异具有统计学意义。并且前列腺癌的浸润深度以及淋巴结转移的个数在使用TMPRSS4后均有明显的降低，相比差异具有统计学意义。结论： TMPRSS4 对于抑制前列腺癌细胞的转移有一定的推动作用，为以后治疗前列腺癌提供了一定的理论依据。 　　关键词： TMPRSS4；前列腺癌细胞；转移机制；抑制研究 　　湖南省教育厅科研课题14C1059 　　前列腺癌是一种发病率较高的恶性肿瘤，其病死率在肺支气管癌、肝癌、胃癌、结直肠癌以及食管癌以后，根据统计其占在第六位。在我国中，前列腺癌在泌尿系统肿瘤中排在第三位，并且根据临床上的统计，其发病率有逐年上升的趋势。前列腺癌的潜在影响因素主要有年龄、遗传、高动物脂肪摄入以及环境污染，吸烟等等[1]。前列腺癌严重影响着患者的身心健康和正常的生活。据报道[2]，癌细胞抑制剂可以有效抑制癌细胞的转移，可以缓解患者的病情，故本次研究重点在于研究TMPRSS4对于前列腺癌细胞的抑制作用，具体报道如下。 　　1材料与方法 　　1.1一般资料 　　收集2014年8月至2015年4月在我院因前列腺癌进行手术切除并在手术后经病理研究确诊的24例患者的组织标本，其均为前列腺癌，且所有患者在手术前未进行过任何化疗或者是针对于肿瘤的任何治疗。患者中年龄为45-78岁，平均年龄54.32±2.14岁，其中淋巴结转移个数3个8例，≥3个的16例。另取同期在男科中进行检查的正常前列腺组织24例。将收集的所有标本保存在-70℃的冰箱中。 　　1.2主要试剂 　　RT-PCR试剂盒买自TaKaRa公司，兔抗人TMPRSS4多克隆抗体买自美国Santa Cruz公司，二抗、显色剂均买自北京金桥生物技术有限公司。所用仪器均为我院所有。 　　1.3 RT-PCR 　　正反引物在被合成之后，按照药物试剂盒上的说明书进行组织中总的RNA提取工作，然后利用A260法测定RNA的纯度和浓度。然后再利用电泳法检测RNA的完整性。 　　1.4 Western blot 　　先将组织中的总蛋白进行提取，紧接着进行蛋白的定量以及分离，然后对其进行上样，然后利用电泳法进行转膜，最后加入抗体在一定的条件下进行孵育。利用计算机图像分析系统分析测定其中的蛋白条带密度。 　　1.5统计学分析 　　采用SPSS 15.0 统计学软件处理数据，结果采用均数±标准差表示，多组比较采用one-way方差分析并行Student’s t检验，P0.05为差异具有统计学意义。 　　2结果 　　2.1 TMPRSS4的表达情况 　　从TMPRSS4的表达情况结果可以得出，正常组织细胞中TMPRSS4的表达情况较高，其中不表达的仅占2例，远低于前列腺癌细胞，而两组中低表达情况无明显差异（P0.05），但是对于中表达以及高表达来讲，正常组织细胞中TMPRSS4据属于中、高表达，并且前列腺癌细胞中是没有的，两者相比，具有显著的差异，差异具有统计学意义（P0.05）。具体如表1。 　　2.2 TMPRSS4的表达与临床病理特征的相关性 　　从TMPRSS4的表达对临床病理特征的相关性来看，TMPRSS4mRNA与TMPRSS4蛋白的表达水平进行比较，TMPRSS4mRNA以及蛋白的表达水平均与浸润深度、TNM分期以及淋巴结转移个数有一定的关系，差异均具有统计学意义（P0.05）。 　　3讨论 　　前列腺癌至今为止在全球的致死率较高，并且发病率也具有较为明显的差异区，虽然我国的前列腺癌致死率不是很高，但是随着生活习惯以及环境问题的不断改变，前列腺癌的发病率逐渐升高，并且根据相关部门的统计研究，该癌症的发病率呈逐年上升的趋势，并且严重危害着我国人民的身心健康[3]。由于前列腺癌的发病较为隐匿，当患者进行就诊治疗时，病情已经较为严重，因此在目前临床医学上对于患者的治疗效果、病情的好转以及可能生存的时间都成为了较为引人关注的问题。 　　根据相关研究报道[2]，肿瘤的侵袭以及转移是肿瘤发展的多环节多步骤的复杂的过程，其致病以及发展机理并没有很明确的表述，但是目前有大量的研究已经证实基因以及蛋白对于肿瘤的发生以及发展具有较为密切的关