三阴性乳腺癌与LuminalA型乳腺癌血清中microRNA―21与microRNAlet―7a表达分析.docVIP

三阴性乳腺癌与LuminalA型乳腺癌血清中microRNA―21与microRNAlet―7a的表达分析 　　【摘要】 目的 分析三阴性乳腺癌与LuminalA型乳腺癌血清中microRNA-21与microRNAlet-7a的表达。方法 40例女性乳腺癌患者， 其中20例三阴性乳腺癌患者作为观察组， 另20例LuminalA型乳腺癌患者作为对照组， 另选取同时期体检结果健康的20例女性作为健康组。检?y三组血清中的miRNA-21与microRNAlet-7a表达水平。结果 观察组血清的microRNA-21水平分别高于对照组和健康组（P0.05）。 　　观察组、对照组与健康组血清中的microRNAlet-7a表达水平分别为（0.06±0.03）、（0.09±0.07）、（0.14±0.13）， 观察组血清中的microRNAlet-7a表达水平低于健康组（P0.05）。观察组Ⅰ期microRNA-21的表达量明显低于Ⅱ～Ⅲ期的表达量， 差异具有统计学意义（P0.05）。结论 microRNA-21与microRNAlet-7a的表达水平可作为三阴性乳腺癌特异性治疗的候选靶点。 　　【关键词】 三阴性乳腺癌；LuminalA型乳腺癌；microRNA-21；microRNAlet-7a 　　DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.31.020 　　乳腺癌是乳腺上皮细胞在多种致癌因子的作用下发生基因突变， 使细胞增生失去控制， 出现无限制的恶性增生， 是威胁女性健康的常见恶性肿瘤[1]。本次作者以三阴性乳腺癌与LuminalA型乳腺癌为例， 分析这两种乳腺癌在血清中microRNA-21与microRNAlet-7a的表达水平， 将结果报告如下。 　　1 资料与方法 　　1. 1 一般资料 选取本院2015～2016年收治的40例女性乳腺癌患者， 其中20例三阴性乳腺癌患者作为观察组， 另20例 　　LuminalA型乳腺癌患者作为对照组， 另选取同时期体检结果健康的20例女性作为健康组。观察组年龄25～68岁， 平均年龄（45.2±8.5）岁。对照组年龄24～69岁， 平均年龄（46.0± 　　8.0）岁。健康组年龄24～68岁， 平均年龄（45.5±8.0）岁。观察组患者雌激素受体[ER]（-）、孕激素受体[PR]（-）、人类表皮生长因子受体[HER-2]（-）。对照组患者ER（+）、PR（+）、HER-2（-）。排除妊娠、感染、严重肝肾功能不全者， 排除糖尿病、心血管疾病等并发症及合并其他肿瘤患者。三组受检者对于本研究均知情且签署知情同意书。三组受检者一般资料比较， 差异无统计学意义（P0.05）， 具有可比性。 　　1. 2 方法 收集三组受检者5 ml静脉血， 离心后取上层血清250 μl， 予以Trizol LS（Invitrogen）混匀后进行温室裂解， 使用RNA（QiaGen miReasy Mini Kit）提取试剂盒常规提取RNA， 并置于零下20℃保存， 使用反转录试剂盒（U6 snRA， PCR primer set， has-miR-21， LNATM PCR primer set）， 实时荧光定量PCR试剂盒（Roche公司）进行逆转反录， 逆转录反应体系参照Clontech2641A， qRT-PCR， 反应体系参照Takara RR820a， 95℃ 5 s， 60℃ 6 s， 40个循环， 引物序列： 　　hsa-miR-21（5’-CGGCGTAGCTTATCAGACTGATG-3’）；hsa-let-7a 　　（5’-GCCGGTGAGGTAGTAGGTTGTATAG-3’）；内参：hsa-miR-1610（5’-TAGCAGCACTAAA TATTGGCG-3’）。 　　1. 3 统计学方法 采用SPSS20.0统计学软件进行数据统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验；不符合正态分布选择秩次非参数检验；计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P0.05表示差异具有统计学意义。 　　2 结果 　　2. 1 三组microRNA-21与microRNAlet-7a的表达水平比较 观察组、对照组与健康组血清中的microRNA-21表达水平分别为（1.23±0.65）、（0.75±0.50）、（0.40±0.30）， 观察组血清的microRNA-21水平分别高于对照组和健康组（t=2.618、5.185， 　　P=0.0000.05）。 　　2. 2 观察组和对照组在年龄、TNM肿瘤临床分期、淋巴结转移中microRNA-21的表达量比较 观察组中microRNA-21 　　Ⅰ期的表达量为（0