三阴性乳腺癌患者中医体质类型分析及其与TOP2A基因表达相关性.docVIP

三阴性乳腺癌患者中医体质类型分析及其与TOP2A基因表达的相关性 　　摘要：目的 探讨TOPA2基因在三阴性乳腺癌中的表达特点及其与中医体质类型的相关性。方法 对符合纳入标准的71例三阴性乳腺癌患者进行体质辨识，统计各体质类型分布情况。采用实时荧光定量聚合酶链反应对有肿瘤组织残存的组织蜡块进行TOP2A基因检测。采用相对定量2-ΔΔCt法分析各个样本目的基因表达的变化。采用单因素相关法对体质类型分布情况（频数）与TOP2A基因扩增表达（表达率）进行相关性分析，采用SPSS17.0统计软件进行分析。结果 71例患者可分为平和质（0例）、气虚质（18例）、阳虚质（10例）、阴虚质（12例）、气郁质（7例）、血瘀质（10例）、痰湿质（8例）、湿热质（6例）、特禀质（0例），均为偏颇体质，气虚质所占比例最大（25.35%），阴虚质（16.90%）和血瘀质（14.08%）次之。TOP2A基因扩增表达与各中医体质呈负相关（P0.05）。结论 三阴性乳腺癌人群体质主要为偏颇体质，以气虚质、阴虚质和血瘀质为主。三阴性乳腺癌常见发病体质中的TOP2A基因表达呈正常或缺失状态，提示化疗敏感性低，预后差。 　　关键词：三阴性乳腺癌；中医体质；TOP2A基因；相关性 　　中图分类号：R273.79 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2015）01-0014-04 　　乳腺癌的临床、病理及分子生物学特征具有特异性，导致个体对治疗的反应性不同。乳腺癌主要依赖于早期诊断和干预及适当的治疗。三阴性乳腺癌是乳腺癌的一种亚型，是指通过免疫组化染色检测受体显示雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和人表皮生长因子受体-2（Her-2）均阴性的乳腺癌[1]，与通过基因芯片技术检测得出的basal-like型乳腺癌有高度的重叠性，是一种死亡率很高、预后很差的乳腺癌。三阴性乳腺癌约占乳腺癌人群的12%～17%，因其受体Her-2为阴性，分化较差，易发生转移，对内分泌治疗反应较差，也不能从抗Her-2的靶向治疗中受益[2]。TOP2A是较新的癌症基因，是17号染色体上编码拓扑异物酶的编码基因，是铂类药物的靶点，而三阴性乳腺癌的化疗正是以铂类为基础的。TOP2A扩增提示患者对蒽环类药物的高反应率，反之，TOP2A基因缺失提示预后不良。文献检索发现，关于乳腺癌证型学的研究较多而体质学的研究较少，三阴性乳腺癌的体质学资料更少。目前，中医“辨体-辨病-辨证”诊疗模式越来越受到重视，体质类型分析在高危体质人群的早期中医药干预中具有指导意义[3-4]。本研究分析71例三阴性乳腺癌患者的中医体质类型，探讨TOP2A基因在三阴性乳腺癌的表达特点及其与中医体质类型的相关性。 　　1 资料与方法 　　1.1 病例来源 　　选择2012年4月-2014年4月卫生部中日友好医院、北京中医药大学第一临床医学院、北京中医药大学东方医院、首都医科大学北京中医医院、中国中医科学院望京医院、浙江省肿瘤医院、杭州市中医院三阴性乳腺癌患者共71例。 　　1.2 诊断标准 　　按照2011 St. Gallen Consensus[5]分类标准，通过免疫组化染色检测受体显示，ER、PR和Her-2均阴性的乳腺癌。 　　1.3 纳入标准 　　①经病理明确诊断并行免疫组化检查的三阴性乳腺癌患者；②具有一定文化程度，可以理解调?宋示砟谌荩虎刍颊咧?情同意。 　　1.4 排除标准 　　①临床调查表填写不完整或资料与实际情况出现矛盾者；②存在认知及行为障者碍；③有严重合并症或并发症者。 　　1.5 中医体质评估与分型 　　根据中华中医药学会颁布的《中医体质分类与判定》[6]标准，在体质门诊专业医师指导下对入组病例进行中医体质辨识。患者回答《中医体质分类与判定表》中的全部问题，每一问题按5级评分，计算原始分及转化分，依标准判定体质类型。原始分=各个条目的分值相加。转化分=（原始分-条目数）÷（条目数×4）×100。根据转化分进行平和体质或是偏颇体质的判定。8种偏颇体质转化分均60分时判定为平和质，其他则判定为偏颇体质；如判定为偏颇体质，则进一步根据8种偏颇体质的最高转化分，判定该患者为此类型的偏颇体质。对患者中医体质进行频数和百分比的分析与统计，分析中医体质类型分布情况。 　　1.6 TOP2A基因检测 　　1.6.1 基因检测材料 Real-Time PCR仪，美国ABI 7500；稳压稳流电泳仪，美国Bio-Rad；数码凝胶成像系统，BINTA公司；计算机图像分析仪，Image-Pro Plus Analysis Soft ware；4 ℃低温高速离心机， Thermo，美国；核酸紫外分光光度计，Biophotometer，德国。Trizol试剂盒，Invitrogen公