东北刺人参遗传多样性RAPD分析.docVIP

东北刺人参遗传多样性的RAPD分析 　　(延边大学农学院，吉林 龙井133400) 　　 　　摘要：应用RAPD技术对7份来源于不同区域的东北刺人参进行了分析，从100条随机引物中筛选出16条引物，共扩增出117条谱带，其中51条为多态带，多态性比率为43．62%，其多态性比率较低#65377;系统聚类分析将7份东北刺人参居群分为2大类群，长白山老岭山脉的东北刺人参居群聚为一类，长白山主峰南侧的东北刺人参居群聚为一类#65377;东北刺人参总体较低的遗传多样性是导致其濒危的原因之一#65377; 　　关键词：东北刺人参；聚类分析；RAPD 　　中图分类号：S567．5+3；Q503文献标识码：A文章编号：0439－8114(2008)06－0627－02 　　 　　RAPD Analysis of Genetic Diversity for Endangered Oplpanax elatus 　　 　　GAO Ri，LIAN Mei－lan，WU Song－quan，PIAO Xuan－chun 　　(Agricultural College of Yanbian University， Longjing 133400，Jilin，China) 　　 　　Abstract：In this study， 7 Oplpanax elatus samplies from different regions of Changbai Mountain were analyzed by using RAPD techniques． 16 polymorphic primers， screened out from 100 random primers， were used and produced 117 reproducible bands． Of them， 51 bands (43．62%) were polymorphic． By cluster analysis the germplasm used in this study was divided into 2 groups： O． elatus of Laoling Mountain for one group， O． elatus of south of Changbai Mountain for the other． The lower genetic diversity was one of the reasons of O． elatu．endangerment． 　　Key words：Oplpanax elatus； cluster analysis； RAPD 　　 　　东北刺人参(Oplpanax elatus Nakai)系五加科刺人参属多年生落叶灌木，又名北五加#65380;刺人参，其分布区域十分狭窄，全世界只在中国#65380;俄罗斯#65380;朝鲜等3国境内有少量分布[1]，在我国主产于吉林省长白山海拔700～1 900 m的针叶林带及辽宁东部山区海拔800～1 000 m的松杉林下#65377;据近几年的调查，整个长白山区小片生长的天然东北刺人参已屈指可数，散生的也已不多[2]，必须采取有效措施予以保护#65377;几年来，国内对东北刺人参的致濒因素和保护对策也进行了一些探讨[3，4]，但尚未见有关东北刺人参遗传多样性的研究报道#65377;遗传多样性的研究不仅有助于了解物种的进化历史和适应潜力，以及探讨物种濒危的机制，同时也关系到能否采取科学有效的措施来保护物种#65377;用于遗传多样性分析的方法很多，其中RAPD方法由于具有简便#65380;灵敏#65380;费用相对便宜#65380;而且可以检测到大量多态位点等优点，已被广泛地用于研究，并获得了满意的结果#65377;本文利用RAPD分子标记法对东北刺人参群体的遗传多样性进行了分析，旨在揭示东北刺人参植物的濒危机制，为更好地保护东北刺人参种群奠定基础#65377; 　　 　　1材料与方法 　　 　　1．1材料 　　野外采集供试东北刺人参植株当年生嫩叶，每地区随机选取10株东北刺人参的叶片，装入保鲜袋，封口，置于样品贮藏箱(由超低温冰袋维持冷藏条件)中带回实验室，－70℃保存待用#65377;各采样地概况和采样数详见表1#65377; 　　 　　1．2RAPD分析 　　1．2．1基因组DNA的提取DNA的提取采用CTAB[5]法，提取DNA后，应用Michemor等的分离群体分组分析法，分别将每个地区的10株DNA样品等量混合，组成7个不同地区的基因池#65377; 　　1．2．2DNA扩增反应程序反应程序设置为：94℃预变性5 min，9