产超广谱β内酰胺酶细菌耐药性分析.docVIP

产超广谱β-内酰胺酶细菌的耐药性分析 　　【摘要】目的:探讨产ESBLs菌的发生率、 耐药特点,为临床治疗提供参考。方法:采用微量肉汤稀释法对139株大肠埃希菌、64株肺炎克雷伯菌和17株产酸克雷伯菌做药敏试验,同时用纸片扩散法确证产ESBLs菌。 结果:产ESBLs菌的检出率分别为:大肠埃希菌41.7%(2007年)和46.8%(2008年);肺炎克雷伯菌25%(2007年)和52.3%(2008年);产酸克雷伯菌66.7%(2007年)和50%(2008年),产ESBLs菌耐药率普遍高于非产ESBLs菌(P0.01或P0.05)。 结论:常规检测和监测产ESBLs菌十分必要,这对指导临床合理用药、有效控制感染的传播意义重大。 　　【关键词】β-内酰胺酶类;抗药性,微生物;大肠埃希菌;克雷伯菌,肺炎;克雷伯菌,产酸 　　 　　近年来,革兰氏阴性细菌由β-内酰胺酶(β-lactamase,BLA)介导的耐药性日益严重,特别是超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases, ESBLs),它是临床上最重要的BLA,由质粒介导,主要产生于大肠埃希菌和克雷伯氏菌属。它是由广谱酶 TEM-1 、TEM-2 和SHV-1编码基因中数个位点发生突变而来。自从1983年在德国首次报道以来,ESBLs的亚型种类不断增加,现从TEM来源的ESBLs有70多种,SHV来源的有20多种。产ESBLs菌可以通过接合、转化和转导等形式使耐药基因在细菌间扩散,造成严重的医院内感染。为了解我院产ESBLs菌的发生率、耐药变迁和耐药特点,以便控制产ESBLs菌的传播和流行,我们对2007年1月~2008年12月临床分离的大肠埃希菌、克雷伯氏菌属进行了耐药性分析。 　　 　　1.材料与方法 　　 　　1.1 菌株来源:所有菌株均来自本院2007年1月~2008年12月住院及门诊病人标本,其中大肠埃希菌139株,肺炎克雷伯菌64株,产酸克雷伯菌17株。 　　1.2 细菌鉴定和药敏试验:使用MicroScan NC 21 鉴定药敏板(美国DADE公司产品)鉴定细菌至种;药敏试验也在板上进行(微量肉汤稀释法),并同时进行ESBLs菌的初步筛选试验,抗生素包括氨苄西林/舒巴坦、阿米卡星、氨苄西林、氨曲南、头孢曲松、头孢他啶、头孢噻吩、头孢西丁、头孢唑啉、环丙沙星、头孢泊肟、头孢吡肟、头孢呋肟、庆大霉素、亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、哌拉西林、复方新诺明、妥布霉素、头孢噻肟共20种。药敏结果按照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)2002年版标准判断。 　　1.3 药敏纸片:头孢噻肟30ug/片,头孢他啶30ug/片,头孢噻肟/克拉维酸30ug/10 ug片,头孢他啶/克拉维酸30ug/10 ug片,均为英国Oxoid 公司产品。 　　1.4 ESBLs检测:经过头孢泊肟等三代头孢菌素和氨曲南的初步筛选后,再采用双纸片法(NCCLS推荐)进行表型确证试验, 头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸一组,头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸一组,细菌接种按照标准的药敏纸片扩散法进行,35℃,16-18h需氧培养,任一组药物的抑菌环直径差值≥5mm,可确证为产ESBLs阳性。质控菌株:大肠埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603 分别作为产ESBLs阴性和阳性对照菌。(均来自四川省临床检验中心) 　　1.5 统计学方法:率的比较用χ2检验。 　　 　　2.结果 　　 　　2.1 产ESBLs菌的检出率:139株大肠埃希菌中,2007年1月~2007年12月共检出60株,产ESBLs阳性率为41.7%(25/60);2008年1月~2008年12月共检出79株,产ESBLs阳性率为46.8%(37/79)。64株肺炎克雷伯菌,2007年共检出20株,产ESBLs阳性率为25%(5/20);2008年共检出44株,产ESBLs阳性率为53.2%(23/44)。17株产酸克雷伯菌,2007年共检出3株,产ESBLs阳性率为66.7%(2/3);2008年检出14株,产ESBLs阳性率50%(7/14)。见表1。 　　 　　2.2 产ESBLs菌与非产ESBLs菌对20种抗生素的耐药率:分别比较了大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌中产ESBLs与非产ESBLs菌的耐药率。 　　 　　由表2可见产ESBLs菌的耐药率均普遍高于非产ESBLs菌,除了亚胺培南和哌啦西林/他唑巴坦,两者的差异大多有显著性或非常显著性意义(P0.05或P0.01)。 在产ESBLs菌中,有2株细菌耐亚胺培南,分别为大肠埃希菌1株和肺炎克雷伯菌1株。 　　 　　3.讨论 　　 　　本研究结果表明,我院产ESBLs菌检出率