婴幼儿喘息的问题与 及思考BAOYIXIAO20100310.pptVIP

基因组DNA抽提 采集口腔颊黏膜拭子，抽提基因组DNA 所有DNA样本置-40℃保存备检 目的基因SNP检测 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法（PCR-RFLP），对IL-13 A2044G和β2-AR R16G位点进行基因分型 IL-13 A2044G检测 引物序列： 正义：5‘AATGAGACAGTCCCTGGAAAG 3’ 反义：5CCGCCTACCCAAGACATTT 3 反应条件： 95℃ 30 S、54℃ 45 S、72℃ 60 S 40个循环 PCR扩增产物为302bp 经Nla IV 酶切后电泳图谱： A/A纯合子基因型为210 bp + 26 bp A/G杂合子基因型为210 bp+ 178bp + 26bp + 22bp G/G纯合子基因型为178bp + 26bp + 22bp β2-AR R16G检测 引物序列： 正义：5 GCCTTCTTGCTGGCACCCCAT 3 反义：5 CAGACGCTCGAACTTGGCCATG 3 反应条件： 95℃ 30 S、66℃ 45 S、72℃ 60 S 40个循环 PCR扩增产物为168bp 经Nco I酶切后电泳图谱： A/A纯合子基因型为168 bp A/G杂合子基因型为168 bp+ 150bp + 18bp G/G纯合子基因型为150bp + 18bp 统计学方法