传统藏药渣驯丸对四氯化碳引起小鼠急性盯损伤保护作用.docVIP

传统藏药渣驯丸对四氯化碳引起小鼠急性盯损伤的保护作用 　　摘要：目的探讨渣驯丸对CCl4引起小鼠急性肝损伤的保护作用。方法将60只昆明种雄性小鼠随机分为6组：正常对照组、模型组、阳性对照组、渣驯丸高、中、低剂量组（1.00g/kg）、（0.50g/kg）、（0.25/kg）。给药组给予渣驯丸灌胃，每天灌胃两次，连续6 d，正常对照组和CCl4模型组给予等体积生理盐水灌胃。在第6 d灌胃末次给药两小时后，除正常对照组外，其余组均腹腔注射0.1%CCl4石蜡油溶液并在24 h后取材，检测血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）活力以及肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、超氧化物歧化酶（T-SOD）、丙二醛（MDA）的活力及含量。结果渣驯丸小剂量组与CCl4模型组相比，血清中ALT、AST的含量明显降低（PO.05），渣驯丸中剂量组能够降低ALT含量（P0.05），渣驯丸小剂量组升高超氧化物歧化酶（sOD）活力（P0.05），渣驯丸大剂量组降低了肝组织中丙二醛（MDA）含量。结论渣驯丸对四氯化碳致肝损伤有一定的保护作用。 　　关键词：藏药；渣驯丸；急性肝损伤；抗氧化；四氯化碳 　　随着社会的发展，肝脏的功能受多种因素的影响，容易造成酒精肝、脂肪肝、肝脏纤维化、肝硬化、甚至肝癌等严重疾病。所以肝保护成了现代医学中急需解决的课题。四氯化碳在多项诱导药物中是最为经典的一种。研究表明，小鼠CCl4急性肝损伤动物模型是经典的氧化性肝损伤动物模型之一。?魍巢匾┰?驯丸，为常用藏药制剂，收藏于藏医典籍和文献资料，其应用已有1300多年历史的，具有广泛的民间用药基础。渣驯丸由渣驯膏、红花、木香、诃子（去核）、甘青青兰药味组成，具有清肝热的功效，主要用于慢性肝炎、乙型肝炎等。本实验研究根据现代医学及传统医药在肝损伤中研究进展作为其立题依据，探讨渣驯丸对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的的影响。建立正确而有效的动物模型，以ALT，AST，MDA，SOD等指标来观察，从而进一步了解机制，为临床应用提供可靠的理论和实验依据。 　　1.资料与方法 　　1.1一般资料 藏药渣驯丸：购自青海省藏医院（批号；超氧化物岐化酶（SOD，批号：FGDJ2014071556）；丙二醛（MDA，批号：GDJ2014071009）；丙氨酸氨基转移酶（ALT，批号：EXCl4070992）门冬氨酸氨基转移酶（AST，批号：ECTl4070992）；考马斯亮兰总蛋白定量（批号：BXCl4070112）均购自南京建成生物研究； 　　1.2仪器 SHB-IIIA循环水式多用真空泵（上海豫康科教仪器设备有限公司），DZF-150型恒温真空干燥箱（郑州长城科工贸有限公司），DNM-9602酶标分析仪（北京普朗新技术有限公司），R2060旋转蒸发器（上海申生科技有限公司），HH-W420数显三用恒温水箱（金坛市科技仪器有限公司），4-M-4型超声振荡器（昆山市超声仪器有限公司），SUNRISE分光光度计（日本日立株式会社），HHHS-65型电热恒温水浴箱（上海衡平器仪表厂），HITACHI U-1900离心机（金坛市科析仪器有限公司），BT224S电子天平（赛多利斯科学仪器（北京）有限公司）。 　　1.3动物 8 w龄昆明种小鼠70只，雄性，体重（20_+2）g，购自甘肃兰州大学医学院（合格证号；SCXK-（甘）2013-0002）。分笼饲养于青海大学医学院实验动物中心。饲养条件：光照明暗12 h交替，自由饮水，温度：（23±2）℃，适应性喂养3 d。 　　1.4方法 　　1.4.1药物提取 取100 g渣驯丸研磨成粉末，加入1000 ml的蒸馏水，煎煮15 min，过滤，连续两次，合并滤液、浓缩滤液至100 ml，得到渣驯丸提取液（含生药1 g/ml），4℃保存。 　　1.4.2动物分组 小鼠70只，随机分为6组：空白组、模型组、阳性组（联苯双酯，150 mg/kg）、渣驯丸高（1.00 g/kg）、中（0.50g/ks）、低（0.25 g/kg）剂量组，每组10只，雌雄各半。 　　1.4.3给药方法 给药组每日灌胃给药，空白组与模型组给予等体积生理盐水，剂量0.2 ml/10 g，2次，d，连续14 d。 　　1.4.4动物造模 在给药2 h后，除正常对照组外，其余各组均腹腔注射0.1%CCl4石蜡油溶液（5 ml/kg）。 　　1.4.5血清中AST和ALT的检测 在腹腔注射0.1%CCl4石蜡油溶液24 h后，摘眼球取血，得到的血液离心10 min，2500 r/min，用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清中的AST（谷草转氨酶）和ALT（谷丙转氨酶）的含量。 　　1.4.6肝脏组织中抗氧化酶活力检测 在