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自身抗体的检测及其临床意义教学文稿.ppt
自身抗体的检测及其临床意义 自身免疫性疾病患者大多数体内均可查出较高滴度的自身抗体,因此自身抗体的检测可帮助临床诊断,评价疗效,估计预后。自身免疫性疾病以血清中出现大量自身抗体为特征,其中与某种疾病密切相关的自身抗体称为该疾病的标志抗体,标志抗体的检出有助于临床医生确诊疾病,具有重要的价值。通过大量的研究及临床资料统计,目前比较公认的部分标志抗体: 标志抗体 相关疾病 抗Sm抗体 系统性红斑狼疮(SLE) 抗dsDNA抗体 系统性红斑狼疮(SLE) 高滴度抗RNP抗体 混合性结缔组织病(MCTD) 抗SSB抗体 干燥综合征(SS) 抗着丝点抗体 进行性系统性硬化症局限型 抗Scl-70抗体 进行性系统性硬化症弥漫型 抗Jo-1抗体 多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM) 抗肾小球基底膜抗体(GBM) 肺出血肾炎综合征(Goodpasture) 抗平滑肌抗体(ASMA) Ⅰ型自身免疫性肝病 抗肝肾微粒体抗体(LKM-1) Ⅱ 型自身免疫性肝病 抗可溶性肝抗原抗体(SLA) Ⅲ 型自身免疫性肝病 抗线粒体抗体2型(AMA-2) 原发性胆汁性肝硬化(PBC) 抗角蛋白抗体(AKA) 类风湿性关节炎(RA) 欧蒙印迹法试剂盒用于体外定性检测血清或血浆中的人抗nRNP、Sm、SS-A(天然SS-A和Ro-52)、SS-B、Scl-70、Jo-1、CENP B、dsDNA、核小体、组蛋白和核糖体P蛋白等14种不同抗原lgG类抗体。 免疫印迹技术(IBT) 免疫印迹技术属于膜载体酶免疫技术,其固相载体为吸附有抗原的硝酸纤维膜。 基本原理是将从小牛或兔胸腔提取的抗原,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,按分子量大小分离成区带,经参照对应分子量标准物质确定每一抗原区带的分子量。然后将各抗原区带转印至硝酸纤维膜上制成抗原吸附载体膜。 将待测血清加在已切成细条的硝酸纤维膜上,待测血清中存在的抗体分别与硝酸纤维膜上的相应抗原区带结合,当再加入酶标记抗人IgG抗体后形成抗原-抗体-酶标记抗体复合物,再加入酶的底物,出现显色反应。凡有抗体与膜上抗原结合的位置,均会因酶促反应而显色。 参照此时抗原区带的分子量及各区带的相应位置,可辨读出各特异性抗体. 抗dsDNA抗体是SLE患者的特征性标志抗该抗体阳性为SLE的重要诊断标准之一。 抗dsDNA抗体在SLE的发病机制中起重要作用,SLE并发的狼疮性肾炎是由该抗体介导的免疫复合物病,抗dsDNA抗体可形成多种冷沉淀而致血管炎,SLE肾炎及典型的蝶形红斑均与该抗体有关。 抗dsDNA抗体诊断SLE的特异性可达95%~100%,但其敏感性仅为30%~50%,因此抗dsDNA抗体阴性不能排除SLE的诊断。 抗RNP抗体 高滴度是混合性结缔组织病(MCTD,夏普综合征)的特异性标志(阳性率为95-100%),抗体滴度与疾病活动性相关;低滴度可见于SLE(15-40%,常伴Sm抗体阳性)。 抗Sm抗体 SLE的标志性抗体(5-30%),与dsDNA一起是SLE的诊断指标,与疾病活动性无关,一般伴有U1-RNP抗体阳性。 抗核小体抗体 SLE标志性抗体(85%),可用于SLE的早期诊断,与狼疮肾炎相关 抗SS-A抗体 与各类自身免疫性疾病相关,最常见于干燥综合征(40-80%)。SLE(20-60%);新生儿红斑狼疮(100%),可引起先天性新生儿心脏传导阻滞。与狼疮肾病的发生相关。抗天然SS-A(60kDa)抗体对SS和SLE的特异性高。该抗体的产生与HLA有关。 抗Ro-52抗体 不具有疾病特异性,而且还可与抗Jo-1和RNP抗体发生交叉反应。 抗SS-B抗体 干燥综合征(40-95%);SLE(10-20%);亚急性皮肤狼疮(25-35%)。 抗Scl-70抗体 进行性系统性硬化症(25-75%),与皮肤硬化、肺部受累及肿瘤有关;抗体滴度与疾病活动性无关。 抗PM- Scl抗体 多肌炎/皮肌炎(8%),弥散性硬皮病(3%);50% PM- Scl抗体阳性见于皮肌炎与硬化症的重叠综合征。 抗Jo-1抗体 多肌炎特异性抗体(25-35%),伴肺间质纤维化时可高达75%。高度提示抗合成酶综合征。 抗PCNA 是增殖性细胞核抗原,是SLE的标志性抗体(2-10%),与SLE弥散性肾小球肾炎相关,对激素治疗敏感。 抗组蛋白抗体 多种结缔组织病中均可出现,在药物诱导的SLE中较常见(阳性率为95%)不具有疾病特异性。仅有此抗体阳性,而不伴有其他ANA,则强烈支持DIL的诊断。与SLE活动性及狼疮肾病相关。 抗着丝点抗体 局限型弥散性硬皮病(30%);CR
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