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低钾胁迫对黄瓜生长和抗氧化酶活性的影响 　　摘 要:以黄瓜为试材,研究了其低钾胁迫下的生理反应。结果表明,相对于正常施钾水平的植株而言,低钾胁迫下黄瓜生长缓慢并出现了失绿症状,同时植株的SOD和APX活性增加,CAT和POD活性下降,MDA含量也随钾处理浓度的降低而升高。 　　关键词:低钾胁迫;黄瓜;丙二醛;抗氧化酶 　　中图分类号:S642.201 文献标识号:A 文章编号:1001-4942(2010)05-0047-04 　　 　　 钾是植物生长发育所必需的矿质元素,对植物生长和新陈代谢起着举足轻重的作用。据统计,全世界13×10??8 hm2耕地中,受到养分严重胁迫的占22.5%,其中大约40%是缺钾。目前,除黑土、黑钙土区钾素营养丰富外,其它地区施钾肥增产效果都很明显。我国大部分地区的土壤普遍缺钾,严重缺钾和一般缺钾的土壤约占全国耕地总面积的23%,钾素缺乏已成为很多地区作物生长的一个胁迫因子。钾元素参与植物体内多种酶活性的调节,一般认为缺钾对叶片光合作用的影响是导致植物生长异常的重要原因。钾元素缺乏通常会导致植物生长矮小、叶尖及叶缘焦枯并出现斑点,症状随生育期的延长而加重,同化物输出受到抑制引起植株的早衰。因此研究低钾条件下作物体内代谢意义重大。 　　 　　1 材料与方法 　　 　　1.1 品种及处理 　　供试黄瓜(Cucumis sativus L.)品种为津春2号。种子经消毒处理后播于湿润的基质中,两片真叶时挑选生长一致的幼苗移栽到装有6 L营养液的塑料盆中进行预培养,每盆6株。全营养液配方如下5.0 mmol/L Ca(NO3)2,5.0 mmol/L KNO3,1.0 mmol/L KH2PO4,2.0 mmol/L MgSO4,10 μmol/L MnSO4,29.6 μmol/L H3BO3,0.95 μmol/L CuSO4,1.0 μmol/L ZnSO4,0.05 μmol/L H2MoO4 。在全营养液中预培养3天后进行处理。以全营养液培养作为对照(CK),低钾处理中钾的浓度为0.5、0.1 mmol/L,其它营养液成分与全营养液相同,共3个处理,每处理重复3次。每4天换一次营养液,处理20天后取样测定各项生理指标。 　　1.2 测定方法 　　1.2.1 株高和生物量的测定 处理后4、8、12、16 d分别测定株高。处理结束后,将植株的地上部和地下部分开,用去离子水冲洗干净,擦干,称重。 　　1.2.2 抗氧化酶活性测定 取样0.5 g加50 mmol/L PBS缓冲液(含2%PVP,0.2 mmol/L EDTA,在测定APX时,加入5 mmol/L AsA)5 ml ,于冰浴中研磨提取,匀浆液于12 000× g下低温离心20 min。上清液用于酶活性和丙二醛含量的测定。 　　SOD活性的测定:按Stewart和Bewley(1980)的方法。取上清液0.05 ml,加3 ml反应液(含13 mmol/L甲硫氨酸,63 μmol/L NBT,1.3 μmol/L核黄素,0.1 mmol/L EDTA;用50 mmol/L pH 7.8的磷酸缓冲液配制)。在25℃、4 000 lx下25 min后,于黑暗下终止反应,立即在560 nm处测定吸光值,以缓冲液代替酶液作为空白。酶活性采用抑制NBT光化学反应50%为一个酶活单位表示。 　　APX活性的测定:采用修改的Nakano和Asada(1981)的方法。取上清液100 μl,加25 mmol/L磷酸缓冲液(pH 7.0,含0.1 mmol/L的EDTA)1 700 μl,20 mmol/L的H2O2 100 μl,5 mmol/L AsA 100 μl,25℃下反应。用岛津紫外可见分光光度仪(SHIMADZUUV-2450PC)按kinetics程序测定OD??290的动力学变化,取其中20 s的动力学变化计算酶促反应速率。吸光系数为2.8。 　　POD活性的测定:按Nickel和Cuningham(1969)的方法。取上清液100 μl,加25 mmol/L磷酸缓冲液(pH 7.0,含0.1 mmol/L EDTA)1 700 μl,20 mmol/L H2O2 100 μl,1%愈创木酚100 μl,25℃下反应。用岛津紫外可见分光光度仪(SHIMADZUUV-2401PC)按kinetics程序测定OD??470的动力学变化,取其中20 s的动力学变化计算酶促反应速率。吸光系数为26.6。 　　CAT活性的测定:采用Patra等(1978)的方法。取上清液100 μl,加25 mmol/L磷酸缓冲液(pH 7.0,含0.1 mmol/L EDTA)1 700 μl,100 mmol/L H2O2 20