结核分枝杆菌及其实验室诊断新技术幻灯片.pptVIP

这是SAT的技术原理：在同一温度下，首先通过M-MLV反转录酶产生靶标核酸（RNA）的一个双链DNA拷贝，然后利用T7 RNA 聚合酶从该DNA拷贝上产生多个（100~1000个）RNA拷贝；每一个RNA拷贝再从反转录开始进入下一个扩增循环；同时，带有荧光标记的探针和这些RNA拷贝特异性结合，产生荧光。该荧光信号可由荧光检测仪器实时捕获，直观反映扩增产物的产生。 郑州大学第一附属医院 郑州大学第一附属医院 结核分枝杆菌及其实验室诊断新技术 赵俊伟（Ph.D, 主管技师） 联系方式：edward35@126.com 郑州大学第一附属医院 检验科 河南省检验医学重点实验室 2015年12月 中国 郑州 结核病又称为痨病和白色瘟疫。 公元三世纪以前，我国古代医学还只是认识到该病可能是一种极为严重的慢性传染病，“累年积月，渐就顿滞，以至于死，死后复转旁人，乃至灭门”。以后逐渐认识到这是一种“肺痨”，其病因为“痨虫”所致。 后来，西方的一些科学家发现这类病人的肺内有一个个坚实的团块，摸上去像土豆或花生这类植物的根上块茎，就将该病称之为Tuberculosis，即结节的意思，这就是结核病命名的由来。 结核病 《红楼梦》：香魂一缕随风散，愁绪??三更入梦遥。 虽然说《红楼梦》与医学无关，但其作者笔下的“痨病”代表林黛玉却惊动全世界。 上世纪50年代，美国细菌学家杜博斯所写的《The White Plague》(白色瘟疫)，就曾提到了林黛玉的肺结核，可见在当时《红楼梦》中林黛玉的病症已是结核病的典型症状。 《黄帝内经素问》：“大骨枯稿，大肉陷下。胸中气满，喘息不便，内痛引肩项，身热，脱肉破腘。” 结核病 结核病目前仍然是一个全球性的严重的公共卫生问题。 结核病 流行过程 传染源 痰涂片阳性的肺结核病人 传播途径 空气传播 易感人群 普遍易感 第二节 流行病特征 影响流行的因素 自然因素 季节、环境、居室通风 社会因素 社会、经济、医疗服务 其他因素 HIV-TB，MDR/XDR-TB 结核病 结核病防控的三大手段 临床诊断常常结合 痰涂片，胸片，症状和体征 结核病 世界防治结核病日 3月24日 结核病是由结核分枝杆菌引起的。。 Robert Koch（1843-1910） 1882年发现结核分枝杆菌，1905年获得诺贝尔生理或医学奖。 Friedrich Neelsen (1854-1898) Franz Ziehl（1857-1926） Ziehl-Neelsen 染色法 （分枝杆菌抗酸染色的基础） 结核分枝杆菌 结核分枝杆菌 （一）生物学性状 1.形态与染色 细长略带弯曲，分枝状，有荚膜，抗酸染色阳性 2. 培养与生长特性 特点 专性需氧 生长缓慢 营养要求高，常用罗氏培养基 生长现象 液体：表面生长（菌膜） 固体：颗粒、结节、花菜状菌落 乳白或米黄，不透明 3. 生化反应 不发酵糖类 ，触酶试验阳性，而热触酶试验阴性 结核分枝杆菌 4. 抵抗力 四不怕 干燥 碱性染料 青霉素等抗生素 对酸或碱有抵抗力 （3% HCl或6% H2SO4、4% NaOH） 四怕 乙醇 湿热 紫外线 抗痨药物 （异烟肼、利福平等） 5. 变异性 形态结构变异： 结核杆菌的L型：颗粒状、丝状 毒力变异： 卡介苗BCG：Calmette和Guérin 牛分枝杆菌 13年230次 耐药性变异： 耐异烟肼及其他抗结核药物的结核菌株日益增多 结核分枝杆菌 致 病 物 质 （二）致病性 荚膜 与细胞表面受体结合（粘附与入侵作用） 含多种酶（分解利用营养物质） 保护（阻止有害物质的进入菌体） 脂质 索状因子（破坏细胞，引起肉芽肿） 磷脂（形成结核结节） 硫酸脑苷脂（抑制吞噬体与溶酶体结合） 蜡质D（引起迟发性过敏反应） 蛋白质 引起迟发性过敏反应 感染方式 呼吸道、消化道或皮肤损伤侵入机体 所致疾病 结核病，以肺结核常见 结核分枝杆菌 （三）免疫性 1. 机体抗结核免疫特点：传染、免疫、超敏反应共存 2. 属于感染免疫(infection immunity)，又称有菌免疫 3. 细胞免疫为主，迟发型超敏反应同时存在 4. 郭霍现象: 注射结核杆菌于豚鼠皮下 初次注射 局部反应小 全身扩散 无免疫无超敏反应 再次注射 局部反应大 不扩散 有免疫有超敏反应 5. 结核菌素试验（OT试验）： 应用结核菌素进行皮肤试验