同时反应萃取体系选择合成甘露糖月桂酸二酯.pdfVIP

第五章 同时反应萃取体系选择合成甘露糖月桂酸二酯 5.1 前言 SFAE 产品往往是由单酯、二酯及少量其他多酯组成的混合物。SFAE 的功能性质与其 结构和组成有着密切的关系，例如相比于单一的单酯产品，单酯与二酯的相互配合使用可 [1] 以显著改善糖酯产品的起泡性和泡沫稳定性 。 在酶法合成 SFAE 中检测或者分离鉴定了二酯乃至三酯[2-4]，这就为酶法合成二酯或多 酯提供了可能。本章将建立一种新的酶催化反应体系，以实现对二酯的选择性合成。 在以往的研究中，鉴于酶法催化合成糖酯是一个热力学可逆的反应过程，因此往往使 用非水单相体系作为反应介质，如有机溶剂[5-6] [7-8] [9] , 离子盐/液体 ，超临界流体 , 或者无溶 剂体系[10] 以提高酶催化效率。 近年来，一种基于水相- 有机相的两相分配生物反应器（two-phase partitioning bioreactor [11-12] ，TPPB ）被用于酶催化反应中 。其可以改变反应进程，使得本来热力学不利 的反应能向着目标产物方向进行。在糖酯的酶促催化合成过程中，两相体系也被用于增加 反应的转化率，所应用的体系组成包括水-有机体系[13-15]，水-离子液体体系[16], 离子液体- 有机体系[17]及离子液体-超临界二氧化碳体系[18] ，但是目前的这些体系都只用于增加单酯 的转化率。 在利用 Novozym 435 催化合成甘露糖月桂酸酯合成的研究中，发现单酯与二酯因结构 上的差异，对不同的溶剂表现出不同的溶解性。本文利用这种差异建立一种全新的反应体 系—— 同时反应萃取体系（Simultaneous Reaction-Extraction system，SRE），利用不同性质 的有机相分别作为酶促催化的反应介质和产物萃取富集介质，以提高二酯的选择性和转化 率，用于二酯的选择性合成。 5.2 实验材料 固定化脂肪酶Novozym 435 购于诺维信（中国）生物技术有限公司；D-甘露糖、月桂 酸、正己烷、乙腈购于中国医药集团上海化学试剂公司；甲醇（色谱纯）购于美国 Tedia 公司；3 Å、4 Å 1/16 分子筛购于上海环球分子筛有限公司（UOP ）。除甲醇外，其它材料 与试剂为分析纯。 5.3 实验方法 5.3.1 同时反应萃取体系（Simultaneous Reaction-Extraction system，SRE ）的建立 在两相体系的构建过程中，鉴于其作为反应溶剂与萃取溶剂的双重作用，选择合适的 有机溶剂对于整个反应体系是极为关键的。在甘露糖月桂酸酯的合成与分离过程中，发现 单酯和二酯因为结构上的不同，在极性上表现出较大的不同，因此在不同极性的溶剂中溶 57 解度差别较大，这些为萃取溶剂萃取提供了必要条件。另外，为保证酶催化反应，应选择 疏水性较大的反应介质，保证脂肪酶活性及稳定性[20-21]，还要兼顾底物在介质中的溶解性。 在甘露糖月桂酸酯的合成与分离过程中，二酯主要溶解在正己烷等非极性溶剂中，单 酯则能够溶于常用的酶反应溶剂体系。因此选用乙腈和正己烷作为溶剂体系构建 SRE 体 系。乙腈可以作为反应相，能作为有效的反应介质为酶催化提供适宜的反应环境；而正己 烷作为萃取相，其与二酯相似的极性为产物萃取提供了条件。而乙腈和正己烷本身不相溶。 图5-1 是同时反应萃取体系中酶催化合成甘露糖月桂酸酯的反应模式。 图5-1 同时反应萃取体系中酶催化合成甘露糖月桂酸酯反应模式 Fig. 5-1 Reaction scheme for lauryl mannoses formation in a SRE system M ：甘露糖；LA ：月桂酸；W ：水；MLM ：单酯；DLM ：二酯；K 和 K ：合成平衡常数；K 和 K ：水解平衡常数；