临床血液学检验造血检验基本方法细胞化学染色检验bqd8s.pptVIP

* 过氧化氢 四甲基联苯胺 亚硝基铁氰化钠 蓝色颗粒 棕色颗粒 图 POX染色原理（四甲基联苯胺法） 水 联苯胺蓝 过氧化物酶 试剂 试剂 * （2）正常血细胞的染色反应 染色成功的标志：成熟中性粒细胞为阳性反应 各系细胞染色反应 粒系：除早期原粒外，其余为阳性 单核系：除早期原单外，其余为弱阳性 淋巴系：阴性 浆细胞系、红系、巨核系：均呈阴性 * * * * 【苏丹黑B染色（SBB染色）】 （1）染色方法及原理 （2）正常血细胞的染色反应 （3）临床应用 同POX染色。POX更特异，SBB更敏感 * 特异性酯酶染色（氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色，CE染色） （1）原理及方法 图 氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色法原理 氯乙酸AS-D萘酚 重氮盐（坚牢紫酱GBC） 红色沉淀 特异性酯酶 （氯乙酸AS-D萘酚酯酶） AS-D萘酚 试剂 试剂 * （2）正常血细胞的染色反应 染色成功的标志：成熟中性粒细胞为阳性反应 各系细胞的染色反应 粒系：早期原粒为阴性，其余为阳性 单核系：阴性 淋巴系：阴性 浆细胞系、红系 、巨核系：均为阴性 * * 非特异性酯酶染色 （1）染色方法及原理：需同时进行NaF抑制试验 最特异 根据 酯酶特异性高低 特异性酯酶(氯乙酸AS-D萘酚酯酶) 非特异性酯酶 pH值不同 酸性酯酶(酸性α- 醋酸萘酚酯酶 ) 碱性酯酶( α-丁酸萘酚酯酶 ) 中性酯酶 α- 醋酸萘酚酯酶 醋酸AS-D萘酚酯酶 * （2）各系血细胞的染色反应 粒系：多为阴性，少数可呈阳性，阳性反应不能被NaF抑制（ α-NBE染色特异性较高，粒系为阴性 ） 单核系：早期原单为阴性，其余为阳性，阳性反应可被NaF抑制 淋巴系：多为阴性，少数可呈弱阳性，阳性反应不能被NaF抑制 其他细胞 * * * 【酯酶双染色】 染色原理及方法：在同一张涂片上进行特异性酯酶染色和非特异酯酶染色 CE染色与α-NAE染色 CE染色与α-NBE染色 各系血细胞的染色反应 临床应用：对AML-M4的诊断具有意义 * 过碘酸-雪夫反应（PAS染色，又称糖原染色） （1）染色方法及原理 细胞内含有乙二醇基的糖类在过碘酸氧化作用下产生双醛基，后者与雪夫（Schiff）染料作用，使无色品红变为紫红色物质沉积，定位于含有多糖成分的部位 * （2）正常血细胞的染色反应 染色成功的标志：成熟中性粒细胞为阳性反应 各系血细胞的染色反应 粒系：早期原粒阴性，其余为阳性，呈弥散状阳性 单核系：早期原单阴性，其余为阳性，呈细颗粒状阳性 淋巴系：多数为阴性，少数为阳性，呈粗颗粒状阳性或块状阳性 红系：阴性 巨核系：阳性 其他细胞 * * 酸性磷酸酶（ACP）染色 （1）染色方法及原理，同时做抗酒石酸酸性磷酸酶染色 正常血细胞的染色结果：粒系、单核系、淋巴系、浆细胞系、巨核系、红系等均呈阳性，抗酒石酸酸性磷酸酶染色均呈阴性 临床应用：主要用于毛细胞白血病（HCL）的诊断及鉴别诊断，毛细胞为阳性或强阳性，不被酒石酸抑制 * 本组细胞化学染色的临床应用 鉴别原粒、原单及原淋细胞 鉴别急性白血病的类型 急性白血病分类 细胞化学染色鉴别急性白血病类型 示例 * 细胞类型 原粒 原单 原淋 POX 阴性或阳性 （常为阳性） 阴性或弱阳性 （常为弱阳性） 阴性 NAS-DCE 阴性或阳性 （常为阳性） 阴性 阴性 α-NAE α-NBE NAS-DAE ANAE 阴性或阳性 （NaF不抑制） 阳性 （NaF完全抑制） 阴性或阳性 （NaF不抑制） PAS 阴性或阳性 （弥散状阳性） 阴性或阳性 （细颗粒阳性） 阴性或阳性 （粗颗粒阳性） ACP 阳性 （酒石酸抑制） 阳性 （酒石酸抑制） 阳性 （酒石酸抑制） * 白血病 慢性白血病 急性白血病 慢性淋巴细胞白血病 慢性粒细胞白血病 急性淋巴细胞白血病 急性髓细胞白血病 M0（微分化） M7（巨核细胞） M3（早幼粒细胞） M2（粒细胞部分成熟型） M6（红、白细胞） M5（单核细胞） M4（粒、单核细胞） M1（粒细胞未成熟型） 原淋 原粒 原粒+原单 原单 骨髓中白血病性原始细胞20% 早幼粒 细胞化学染色 * ALL原淋 M1原粒 M4原粒+原单 M5原单 细胞化学染色 * 【细胞化学染色鉴别急性白血病的类型】 POX染色：最重要、首选的常规细胞化学染色，是鉴别急性淋巴细胞白血病和急粒髓细胞白血病的重要指标 原始细胞阳性率≥3%为AML的M1～M5 原始细胞阳性率＜3%为ALL等 CE染色：能较特异地识别粒系细胞，用于辅助鉴别急性白血病的类型（M1、M2、M3、M4） 非特异性酯酶染色及NaF抑制试验：能较特异地识