微生物的操作规程.docVIP

第一部分微生物检验的准备工作 1.1 HYPERLINK \l 微生物化验室的注意事项 微生物化验室的注意事项 1.1.1化验室的清洁 1.1.2无菌室的要求 1.1.3操作前的准备工作 1.2 HYPERLINK \l 微生物检验玻璃器皿的清洗 微生物检验玻璃器皿的清洗 1.3 HYPERLINK \l 微生物检验器皿的包扎 微生物检验器皿的包扎 1.4 HYPERLINK \l 消毒和灭菌 消毒和灭菌 1.4.1化学灭菌法 1.4.2物理灭菌法 1.4.2.1干热灭菌 1.4.2.2高压蒸气灭菌 1.4.2.3间歇灭菌 1.4.2.5紫外杀菌 第二部分取样方法 2.1 HYPERLINK \l 无菌取样的一般方法 无菌取样的一般方法 2.2 HYPERLINK \l 容器取样 容器取样 2.3 HYPERLINK \l 酵母泥的取样 酵母泥的取样 2.4 HYPERLINK \l 表面取样 表面取样 2.5 HYPERLINK \l 空气及气体取样 空气及气体取样 2.5.1空间空气取样 2.5.2压缩气体取样 2.6 HYPERLINK \l 固体物质取样 固体物质取样 2.6.1颗粒状物质 2.6.2粉状物质 2.7 HYPERLINK \l 洗净瓶和听的取样 洗净瓶和听的取样 第三部分培养基 3.1 HYPERLINK \l 培养基的定义 培养基的定义 3.2 HYPERLINK \l 培养基的分类 培养基的分类 3.3 HYPERLINK \l 培养基的制作 培养基的制作 3.4 HYPERLINK \l 培养基的检定 培养基的检定 3.5 HYPERLINK \l 培养基的储存 培养基的储存 3.6 HYPERLINK \l NBB培养基 NBB培养基 第四部分实验室检测方法 4.1 HYPERLINK \l LH系列层流洁净工作台操作规程 LH系列层流洁净工作台操作规程 4.2 HYPERLINK \l 样品的稀释 样品的稀释 4.3 HYPERLINK \l 膜过滤法 膜过滤法 4.3.1试验室膜过滤法 4.3.2过滤膜的培养 4.4 HYPERLINK \l 平皿培养 平皿培养 4.4.1混合平皿培养 4.4.2平皿涂布培养 4.5.1好氧培养 4.5.2厌氧培养 4.6 HYPERLINK \l 显微镜检查 显微镜检查 4.7 HYPERLINK \l 细菌革兰氏染色鉴别法（KOH法） 细菌革兰氏染色鉴别法 4.8 HYPERLINK \l 过氧化氢酶试验 过氧化氢酶试验 第五部分各种菌类的检测方法 5.1 HYPERLINK \l 一般好氧性微生物的测定 一般好氧性微生物的测定 5.1.1细菌总数的测定（培养皿法） 5.1.2细菌总数的测定（膜滤法） 5.1.3酵母中一般好氧性菌的测定 5.2 HYPERLINK \l 酵母数的测定（膜滤法） 酵母数的测定 5.3 HYPERLINK \l 厌氧菌总数的测定 厌氧菌总数的测定 5.3.1厌氧菌总数的测定（培养皿法） 5.3.2厌氧菌总数的测定（膜滤法） 5.3.3乳杆菌属、片球菌属、梳状菌属和巨球菌属的检测 5.4 HYPERLINK \l 大肠菌群的测定 大肠菌群的测定 第一部分微生物检验的准备工作 1.1微生物化验室的注意事项 1.1.1化验室的清洁 (1)、在化验室操作时，必须穿工作服、帽子，无菌操作要求严格，操作应在无菌室里进行。 (2)、所有的培养物，被污染的玻璃器皿及阳性的检验标本，应放入消毒水中浸泡消毒，再用高压蒸气灭菌或用水煮沸后再清洗。 (3)、工作完毕，双手应用肥皂和水洗净。 1.1.2无菌室的要求 (1)、无菌室应分为无菌操作间和缓冲间，缓冲间要比无菌操作间大一些。 (2)、无菌室的高度应在2.2—2.5米为好。 (3)、缓冲间、无菌操作间的门，不能互相对着，应错开，而且是侧拉门。 (4)、缓冲间、无菌间以及操作台内各安装30瓦的紫外灯一支，10—15每平方米安装30瓦的紫外灯管1支为宜。紫外灯安装在离操作台面1.0—1.5米高度处为宜。 (5)、无菌室的室温应控制在18—25oC，相对湿度为40—60%为宜。 1.1.3操作前的准备工作： (1)、无菌室应定期用紫外灯进行杀菌，室内每天用紫外灯灭菌20--30分钟，地面应保持清洁，无卫生死角。 (2)、无菌操作必须在超级净化工作台里进行，在使用超级净化工作台前先开紫外灯照射30分钟，然后关掉紫外灯，待30分钟后开照明灯及无菌风。 (3)、经常对无菌室进行无菌程度的检查。 (4)、操作前先将待检样品用75%的酒精消毒后放入无菌操作台。 (5)、进入无菌室前，应先做好个人卫生工作，换上工作鞋，穿工作服，带帽。工作服、工作鞋、帽、