梨几丁质酶基因克隆及其生物信息学分析.PDFVIP

梨几丁质酶基因克隆及其生物信息学分析.PDF

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中国农学通报 2015,31(9): 184-193 Chinese Agricultural Science Bulletin 梨几丁质酶基因克隆及其生物信息学分析 1 1 1 1 2 2 李伟阳 ,曾 斌 ,李 疆 ,田 嘉 ,李秀根 ,王苏珂 1 (新疆农业大学林学与园艺学院/新疆农业大学果树学新疆特色果树研究中心,乌鲁木齐830052 ; 2 中国农业科学院郑州果树研究所,郑州450009 ) 摘 要:对克隆获得的梨几丁质酶基因Lchi 1 进行生物信息学分析,从而为该基因的功能鉴定提供理论 基础,以期为梨的抗病育种提供基因来源。根据Genbank 中已克隆得到的几丁质酶基因保守区,在梨基 因组数据库中进行Blast 比对,调取DNA 序列,从而设计引物,以高抗腐烂病品种‘小香水’(Pyrus ussuriensis cv. Xiaoxiangshui )为研究材料,克隆获得梨几丁质酶Lchi 1 基因cDNA 全长,并对其进行初步 的生物信息学分析。梨基因组数据库中调取的DNA 序列2535 bp ,含有3 个外显子区、2 个内含子区。 Lchi 1基因全长1300 bp ,编码322 个氨基酸,其蛋白的分子式为C1607H2407N415O468 S17 ,分子量为35573.3 Da , 理论等电点为7.10。二级结构以无规则卷曲和α-螺旋为主,三级结构具有高度保守性。Lchi 1编码蛋白 为可溶性胞外蛋白,存在少量的潜在磷酸化位点,属于糖苷水解酶19 家族,含有N-端信号肽,但是缺乏 几丁质结合区。Lchi 1 基因属于CLASS Ⅱ几丁质酶基因,与其他科属植物的几丁质酶基因相似性均 较高。 关键词:梨;几丁质酶;Lchi 1 基因;生物信息学 中图分类号:S661.2 文献标志码:A 论文编号:cas CloningofPearChitinaseGeneandBioinformaticsAnalysis 1 1 1 1 2 2 LiWeiyang,ZengBin,LiJiang,TianJia,LiXiugen,WangSuke (CollegeofForestryandHorticultureofXinjiangAgriculturalUniversity/theCharacteristicsFruitTreeResearchCenterofXinjiang1 AgriculturalUniversity,Urumqi830052; 2ZhengzhouFruitResearchInstituteChineseAcademyofAgricultureSciences,Zhengzhou450009) Abstract:ThepearchitinasegeneLchi1wasclonedandthegenerelatedinformationofthebioinformaticswas analyzed.Thusthestudycouldprovideatheoreticalbasisfortheidentificationofgenefunction,andprovidea sourceofgeneforpearresistancebreeding.Accordingtotheconservedsequenceoftheplantchitinasegenein Genbank,Blastwascarriedoutinthepeargenomedatabase,andtheDNAs

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