微生物工程实验指导2009（完整）.docVIP

微生物工程实验指导 河北农业大学 生命科学学院制药工程系 2007年10月 实验一 细菌生长曲线的测定 一、实验目的 了解细菌生长曲线特点及测定原理； 学习用比浊法测定细菌的生长曲线。 二、原理 将少量细菌接种到一定体积的、适合的新鲜培养基中，在适宜的条件下进行培养，定时测定培养液中的菌量，以菌量的对数作纵坐标，生长时间作横坐标，绘制的曲线叫生长曲线。它反映了单细胞微生物在一定环境条件下于液体培养时所表现出的群体生长规律。依据其生长速率的不同，一般可把生长曲线分为延缓期、对数期、稳定期和衰亡期。这四个时期的长短因菌种的遗传性、接种量和培养条件的不同而有所改变。因此通过测定微生物的生长曲线，可了解各菌的生长规律，对于科研和生产都具有重要的指导意义。 测定微生物的数量有多种不同的方法，可根据要求和实验室条件选用。本实验采用比浊法测定，由于细菌悬液的浓度与光密度（OD值）成正比，因此可利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度，并将所测的OD值与其对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线，此法快捷、简便。 三、实验材料 1. 菌种 大肠杆菌（E.coli） 2. 培养基 肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏 3g，蛋白胨 10g，NaCl 5g，琼脂 15-20g，水 1000mL，调pH 7.0-7.2。 3. 仪器和器具 721分光光度计，比色杯，恒温摇床，无菌吸管