平面色谱的技术.ppt

色谱技术简介 Brief introduction 薄层色谱 溶剂选择性三角形 * * 色谱技术简介 Brief introduction 平板色谱 ------ 薄层色谱 、纸色谱、薄层电泳 气相色谱 ------ 气固色谱 、气液色谱 液相色谱 ------ 正相色谱 、反相色谱 、超临界流色谱 、逆流色谱、电色谱 色谱技术简介 Brief introduction 平板色谱 1.平板色谱一般分离过程 将试样点在色谱滤纸或层析板的一端，并将该端浸在作为流动相的溶剂（常称之为展开剂）中，随着溶剂向上的移动，经过试样点时，带动试样向上运动。 纸层析和薄层层析流动相的移动是依靠毛细作用。 比移值（R?)：溶质移动距离与流动相移动距离之比 × 溶质 原点 前沿 吸附剂或载体的选择及薄层的制备 薄层的预处理 点 样 样品的制备 色谱前衍生化 薄层板预平衡 展 开 定 位 定性 定量 平板色谱法操作流程图 色谱技术简介 Brief introduction 平板色谱 1）纸色谱 载体：滤纸（纤维素），可吸附~22%水，其中 ~6%与纤维素上的羟基结合（通过氢键和分子 　　　　　 之间的偶极作用）形成固定相 纸 ~22%H2O ~6%H2O 固定相 流动相 S S S S S S S 纸色谱属于分配色谱 ------ 正相和反相分配纸色谱 色谱技术简介 Brief introduction 纸色谱 2)薄层色谱 薄层　　 　分离机制　 主要应用范围　　　 氧化铝板 吸附 脂肪和芳香化合物、生物 硅胶板 吸附 碱、甾类、萜类 改性硅胶 C2,C8,C18RP 正相、反相 非极性物质、极性物质 CN板 正相、反相 农药、酚类、甾类 NH2板 正相、反相、 核苷酸、农药、酚类、甾类、 阴离子交换 维生素类、嘌呤衍生物 纤维素 分配 氨基酸、梭酸 乙酰纤维素 正相、反相 蒽醌类、抗氧化剂 离子交换剂 阴、阳离子交换 氨基酸、梭酸、氨基糖、肽 聚酰胺 分配 黄酮类、酚类 葡聚糖凝胶 凝胶过滤 蛋白质、核苷酸 色谱技术简介 Brief introduction 薄层色谱 2.薄层色谱操作技术 1)薄层板 (1)载体： 硅胶：表面带有硅醇基，pH = 4.5，经150℃活化脱水 后，4~6个硅醇基/nm2 (2)薄层参数： ①厚度： 普通薄层 高效薄层 制备薄层 0.25mm 0.2mm 0.5~2mm ② 活度：吸附剂的吸附能力可用活度表示,它随含水量的增加而减弱 色谱技术简介 Brief introduction 薄层色谱 ２０ １５ １２ １０ － 硅胶 １５ Ⅴ １０ Ⅳ ６ Ⅲ ３ Ⅱ 增 强 － Ⅰ 氧化铝 吸附力 含水量Ｗ％ 活度级别 硅胶、氧化铝活度、含水量与吸附力的关系 色谱技术简介 Brief introduction 薄层色谱 不同温度下硅胶表面硅醇基吸附水分子层的损失情况 色谱技术简介 Brief introduction 薄层色谱 (3)粘合剂与添加剂 ①粘合剂 　a.煅石膏（CaSO4·2H2O)：120~140℃烘烤2~4h,过200目筛，密闭备用。 　b.梭甲基纤维素钠（ＣＭＣ-Ｎa)：0.2~1.0% ②添加剂 　a.荧光指示剂 ZnSO4:Mn