GB/T 7918.2-1987化妆品微生物标准检验方法　细菌总数测定.pdf

中华 人 民共 和 国国家标 准 UDC 668.58:576 化妆品微生物标准检验方法 .85.07 细 菌 总 数 测 定 GB 7918.2一 87 Standardmethodsofmicrobiological examinationforcosmetics Standardnlatecount 细菌总数系指 18或1ml化妆品中所含的活菌数量。测定细菌总数可用来判明化妆品被细菌污染 的程度，以及生产单位所用的原料、工具设备、工艺流程、操作者的卫生状况，是对化妆品进行卫生学评 价的综合依据. 本标准采用标准平板计数法。 1 方法提要 化妆品中污染的细菌种类不同.每种细菌都有它一定的生理特性，培养时对营养要求.培养温度、培 养时间、pH值、需氧性质等均有所不同。在实际工作中，不可能做到满足所有菌的要求，因此所测定的 结果，只包括在本方法所使用的条件下(在卵磷脂、吐温80营养琼脂上，于37℃培养48h)生长的一群 嗜中温的需氧及兼性厌氧的细菌总数。 2 培养基和试荆 2.1 生理盐水:见GB7918.1-87化《妆品微生物标准检验方法 总则》。 2.2 卵磷脂、吐温80一营养琼脂培养基 成分:蛋白陈 20g 牛肉膏 3g 氯化钠 5g 琼脂 15g 卵磷月旨 1g 吐温80 7g 蒸馏水 1000m1 制法:先将卵磷脂加到少量蒸馏水中，加热溶解，加入吐温80将其他成分(除琼脂外)加到其余的蒸 馏水中，溶解.加入已溶解的卵磷脂、吐温80,混匀，调pH值为7.17.4，加入琼脂，121C (151b) 20min高压灭菌，储存于冷暗处备用。 3 仪器 3.1 锥形烧瓶。 3。2 量筒。 3.3 pH计或精密pH试纸。 3.4 高压消毒锅。 中华人民共和国卫生部 1987一05一28批准 1987一10一01实施 GB 7918.2一 87 3.5 试管。 3.6 灭菌平皿:直径9cm, 3.7 灭菌刻度吸管:10ml,2m1,lml, 3.8 酒精灯。 3.9 恒温培养箱。 3.10 放大镜。 4 操作步软 4.1 用灭菌吸管吸取I:10稀释的检样2ml，分别注入到两个灭菌平皿内，每皿]ml。另取lml注入 到9m1灭菌生理盐水试管中(注意勿使吸管接触液面).更换一支吸管，并充分混匀，使成 I:100稀释 液。吸取2ml，分别注入到两个灭菌平皿内.每皿 lml。如样品含菌量高.还可再稀释成 1:1000, 1:10000,… 等.每种稀释度应换1支吸管. 4.2 将熔化并冷至45^50℃的卵磷脂、吐温80、营养琼脂培养基倾注平皿内，每皿约 15ml，另倾注 一个不加样品的灭菌空平皿，作空白对照。随即转动平皿，使样品与培养荃充分混合均匀，待琼脂凝固 后，翻转平皿，置37℃培养箱内培养48h, 5 菌落计数方法 先用肉眼观察，点数菌落数，然后再用放大5^-10倍的放大镜检查，以防遗漏。记下各平皿的菌落 数后。求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。若平皿中有连成片状的菌落或花点样菌落蔓延生长 时，该平皿不宜计数。若片状菌落不到平皿中的一半，而其余一半中菌落数分布又很均匀，则可将此半 个平皿菌落计数后乘2，以代表全皿菌落数. 6 菌落计擞及报告方法 6.1 首先选取平均菌落数在30-300之间的平皿，作为菌落总数侧定的范围。当只有一个稀释度的 平均菌