热板法镇痛试验-浙江大学.PDF

神经精神与运动1（模块II） 热板法镇痛实验 Analgesic experiments with hot plate method 浙江大学医学院 王梦令PhD Email:ml_wang128@zju.edu.cn 实验目的 1. 掌握镇痛药的实验法; 2. 观察麻醉性镇痛药哌替啶（dolantin杜冷丁）与非 麻醉性镇痛药罗通定（rotundine）的镇痛效应。 实验原理 疼痛(pain) •伤害性刺激所引起的情绪反应、行为反应以及生理功能 障碍，是许多疾病的症状，是机体受到不良刺激或损害的 一种信号和反应。 •锐痛和钝痛。 实验原理 疼痛模型 1.热刺激模型 2.机械刺激模型 3.电刺激模型 4.化学刺激模型 •热刺激、机械刺激及电刺激致痛模型均适用于筛选麻醉性 镇痛药 －与锐痛接近 •化学刺激致痛模型（扭体法）适用于筛选解热镇痛药 －与 钝痛接近。 实验原理 热板法 • 仪器装置简单，反应灵敏，指标明确。 • 对组织损伤小，可反复利用动物。 • 痛反应潜伏期长，利于比较药物镇痛作用的强弱、快慢、 持续时间。 • 主要用于筛选麻醉性镇痛药，并不适用于筛选解热镇痛药， 后者可使用化学性致痛模型进行评价。 实验原理 镇痛药(analgesics) 1. 麻醉性镇痛药-依赖性和成瘾。 2. 非麻醉性镇痛药-包括中枢性和周围性两类，如NSAIDs。 实验原理 哌替啶 （dolantin杜冷丁） •合成品，吗啡代用品,较吗啡的成瘾性轻; •作用于中枢神经系统的阿片受体而发挥作用; •镇痛效力约比吗啡弱(1/10~1／8)，持续时间也比吗啡短 （0.5hr-2.5hr）。 实验原理 罗通定 （rotundine） •结构为四氢巴马汀; •镇痛作用比dolantin弱，无成瘾性。 •阻断脑内DA受体，增加与痛觉有关的特定脑区脑啡肽原和内 啡肽原的mRNA表达，促进脑啡肽和内啡肽的释放镇痛作 用。 材料和方法 •实验材料 雌性小鼠；超级恒温器；2.5g/Ldolantin， 2.5g/Lrotundinesulfate，生理盐水（NS）。 •实验方法 将小鼠置于一定温度的热板上，热刺激小鼠足部 产生痛反应，即舔足反应。以小鼠出现舔足的时间作用为痛 反应指标，判断药物是否具有镇痛作用。 材料和方法 1.预选动物：将小鼠置于热板仪内，温度55±0.5℃，测 定小鼠的痛阈值，测2次，间隔5min，以小鼠舔后足作 为观察指标。预选30s内出现痛反应的小鼠。  2.分组及给药：取预选合格的小鼠，随机分为三组。 A组 i.p.dolantin25mg/kg(2.5g/L,0.1ml/10g) B组 i.p.rotundine25mg/kg(2.5g/L,0.1ml/10g) C组 i.p.生理盐水（0.1ml/10g）  3.痛阈测定:给药后15、30、60min测定，若小鼠 60s内无痛反应，立即取出，按60s计算。 3.材料和方法  4．痛阈计算：实验完毕，计算各给药组的用药前后各次的小 鼠热痛反应时间(痛阈值)的平均值，计算痛阈提高百分率。 实验结果 表1杜冷丁、罗通定、生理盐水对小鼠痛阈值的影响 杜冷丁痛阈值（秒） 罗通定痛阈值（秒） 生理盐水痛阈值（秒） 0 15 30 60 0 15 30 60 0 15 30 60 1 2 3 4 5 6 痛阈提高 百分率 （％） 实验结果 实验注意事项 1.用雌性小鼠，痛阈反应时间超过60s应立即取出以免烫伤 足部; 2.室温以15℃左右为宜，过低反应迟钝，过高则敏感。