GB/T 17999.2-1999SPF鸡　血清中和试验.pdf

GB/e17999.2--1999 前 言 本标准参照美国SPAFAS公司的血清中和试验(SN)操作规程编制而成。 SPF鸡微生物学质量控制国家系列标准，包括SPF鸡微生物学监测总则和9种SPF鸡微生物学检 测方法。本标准为S《PF鸡 血清中和试验》。 SPF鸡微生物学检测方法还包括以F部分: GB/T17999.1-1999 SPF鸡 红细胞凝集抑制试验; GB/T17999.3--1999SPF鸡 血清平板凝集试验; GB/丁17999.4-1999 SPF鸡 琼脂扩散试验; GB/T17999-5-1999 SPF鸡 酶联免疫吸附试验; GB/T17999.6一1999 SPF鸡 胚敏感试验; GB/T17999.7-1999 SPF鸡 鸡白痢沙门氏菌检验; GB/T17999.8--1999 SPF鸡 试管凝集试验; GB/T17999.9-1999SPF鸡 间接免疫荧光试验。 本标准山中华人民共和国农业部、国家科学技术部提出 本标准由农业部畜牧兽医司归n 本标准起草单位:农业部实验动物研究中心、山东省农科院家禽研究所 本标准主要起草人 赵立红、陈德威、张秀美、秦卓明。 中华人民共和 国国家标准 GB/T 17999.2-1999 SPF鸡 血清中和试验 SPFchicken-Serum neutralizationtest 范围 本标准规定了血清中和试验所用试剂、材料，操作程序及结果判定等。 本标准适用fSPF鸡感染以下病毒后的中和抗体的监测:禽脑脊髓炎病毒(AvianEn cephalomyelitisVirus)、传染性支气管炎病毒(InfectiousBronchitisVirus)、传染性喉气管炎病毒(In fectiousLaryngotracheitisVirus)、传染性法氏囊病病毒(InfectiousBursalDiseaseVirus), 2 原理 中和试验系指有生物活性的病毒与相应的抗体结合后，可失去原有的生物活性的中和反应。中和反 应不仅有高度特异性，巨具有严格的量的关系。因此可用中和试验鉴定病毒，也可用于相应抗体的定量 检测。 3 试剂和器材 3.1 试剂 3.1.1 蛋白肪磷酸肉汤。 3.1.2 青霉素/链霉素(双抗)液。 3.1.3 300碘溶液。 3.1.4 SPF蛋 3.2 器材 I2门 蛋钻(打孔器)。 3.2.2 6针‘头。 3.2.3 7:针头。 3.2.4 混合器。 I2.5 照蛋器。 3.2.6 常规实验设备。 4 操作程序 4门 试验准备 4.1.1 血清样品处理 被检血清和阳性对照血清经56C30min--45min灭活，保存于一20C条件下备用。 4.1.2 SPF蛋准备 4.1.2.1 共需12枚蛋 4门.2.2 照蛋检查胚体活力，试验只用健康胚 4.1.2.3根据病毒种类选择篷f日〕兰丝立竺塑垫迎些逛鱼塑迷鱼喳堕二一 国家质量技术监督局1999一11一10批准 2000一04一01实施 BGr/ 17999.2-1999 表 1 病毒接种胚龄与方法 病毒 胚龄,a 接种方法 禽脑脊髓炎病毒 5- 7 Ys 传染性支气管炎病毒 9- 11 CAS 传染性法氏囊病病毒 10 CAM 传染性喉气管炎病毒 9- 11 C