基于间接竞争原理流式微球技术快速检测麦芽中赭曲霉毒素A.docVIP

基于间接竞争原理流式微球技术快速检测麦芽中赭曲霉毒素A 　　摘 要 建立了一种快速、灵敏检测中药麦芽中赭曲霉毒素A（Ochratoxin A， OTA）含量的间接竞争流式微球方法。麦芽样品经60%甲醇/PBS提取，加入20%甲醇/PBS溶液稀释5倍后，离心取上清液制备样品。在编码荧光微球上偶联牛血清白蛋白OTA（BSAOTA）复合物，与样品中OTA竞争结合抗OTA特异性抗体，然后加入FITCIgG孵育，离心洗涤后，用流式细胞仪检测微球表面的平均荧光强度，实现样品中OTA的准确定性定量测定。本方法检测OTA的半数抑制浓度IC50为1.20 ng/mL，相关系数R2=0.9892，检出限（IC10）为0.12 ng/mL， 加样回收率为93.9%～97.4%，RSD3.6%。16份实际麦芽样品中检测到2个阳性样品，OTA的最高含量为3.83 　　SymbolmA@ g/kg，未超出欧盟的OTA限量标准，与液相色谱串联质谱（LCMS/MS）法检测结果相一致。本方法简单、快速、灵敏、可靠，可拓展用于其它复杂基质中多种真菌毒素的定性与定量检测。 　　关键词 流式微球技术；间接竞争；麦芽；赭曲霉毒素A；快速检测 　　1 引 言 　　赭曲霉毒素A（Ochratoxin A， OTA）是由曲霉属和青霉属真菌产生的有毒次生代谢产物[1]，具有严重的致癌、致畸、致突变及肝细胞毒性、免疫抑制