基于高分辨质谱技术农药与生物大分子相互作用分析方法.docVIP

基于高分辨质谱技术农药与生物大分子相互作用分析方法 　　摘要建立了检测农药小分子与生物大分子（BA蛋白，O酶）相互作用的高分辨质谱分析方法。对相应结合产物进行质谱检测，结果表明，BA蛋白与甲基对硫磷分子在开始相互作用 min后达到饱和，且每个蛋白分子最多与个甲基对硫磷分子结合；BA蛋白与甲维盐不存在相互作用。通过对O酶与敌敌畏，阿维菌素及噻呋酰胺结合产物的质谱检测发现每个O酶最多结合2个敌敌畏分子，1个阿维菌素分子，且不与噻呋酰胺相互作用。此外，实验表明，O酶与阿维菌素分子作用 min后达到平衡，与敌敌畏分子作用2 min后达到平衡。通过对两种蛋白结合农药小分子过程的时间分辨分析发现，两种生物大分子结合农药小分子的机理过程存在差异。本方法与相关标准方法（荧光光谱法，NB试剂盒法）及分子模拟对接结果比对说明，本方法切实可靠。本方法具有耗样量少、检测速度快、可提供多方面信息等优点，在新农药的研发及其安全性评价方面具有实用价值。 　　关键词高分辨质谱； 分子相互作用； 农药； 牛血清白蛋白； 超氧化物歧化酶 　　1引言 　　农药在确保粮食安全、农业稳产增收等方面发挥着重要作用，新农药的研发具有相当的社会价值和现实意义[1]。大部分农药为有机小分子，多通过特异性结合对应靶标蛋白抑制生物体的生理功能[2，]，进而达到除草、杀虫等目的。因此，研究农药与生物大分子的相互作用不仅对相关药