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色谱柱基础知识简介 色谱柱工作原理 当流动相中携带的混合物流经固定相时，其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中流出。 色谱柱的分类 2.1 色谱柱主要分为填充柱和毛细管柱 注：此外，还有一些综合了填充柱和毛细管柱特点的特殊色谱柱，例如Alltech公司采用专利技术生产的集束管毛细管柱。 2.2 填充柱与毛细管柱的比较 表1 填充柱与毛细管柱的比较 色谱柱 内径/mm 长度/m 柱材料 柱容量 载气流速 填充柱 2-5 0.5-3 玻璃或金属材质 mg 20-30mL/min 毛细管柱 0.10-0.80 10-100 熔融石英或不锈钢、 聚酰亚胺涂层 ng 1-10mL/min 注：毛细管柱外层为聚酰亚胺，可修补柱子缺陷（即增强柔韧性）并且增加强度。 填充柱 3.1填充柱的构成 3.1.1 填充柱的柱管 填充柱可以使用任何类型的柱管，只要它对样品是清洁,、惰性的, 以及能够承受GC的柱箱温度，像：不锈钢管、玻璃管、铜管、聚四氟乙烯管、聚合物管等。 3.1.2固体载体(颗粒)和固定相 近距离观察一个填充颗粒,会发现它是由一个固体载体(颗粒)和在它上面均匀涂渍的涂敷物(叫做固定相)所组成。 固体载体即液态固定相附着的载体，其细小、均匀、多孔，增加与样品接触的表面积。 常用的固体载体为硅土。固体载体也有不同大小的颗粒度，颗粒度是指“目数大小”。一般是根据柱径来选择固体载体的粒度，保持载体的直径为柱内径的1/20为宜。常用60-80目及80-100目。 表2 直径大小与目号的关系 颗粒大小（目） 平均的直径范围 60/80目 177至260μm 80/100目 149至177μm 100/120目 125至149μm 120/1400目 105至125μm 四、毛细管柱 4.1 毛细管柱的构成 毛细管色谱柱由两个主要部分组成：管身和固定相。 4.1.1 管身 毛细管柱的管身一般使用熔融二氧化硅或不锈钢作为基本材质。 熔融二氧化硅即高纯度合成石英（以下通称熔融石英)，通常在其表面涂上一层聚 酰亚胺做为保护层。 当实验要求更高的使用温度时，我们可以来用不锈钢毛细柱来代替熔融石英毛细柱。不锈钢毛细柱在使用温度(耐高温）及日常维护（不易折断等)的性能和指标上都优于熔融石英毛细柱。但是不锈钢材质的惰性没有熔融石英好，它可以和许多的化合物相互作用，产生反应。所以通常我们也会用化学方法对其进行处理，或者是在它的内壁再涂上薄薄的一层熔融石英，以增加不锈钢管的隋性：经过适当处理后，不锈钢毛细柱的惰性与熔融石英毛细柱的不相上下。 4.1.2 固定相 固定相种类很多。大部分的固定相是液体或胶状的高分子量，具有高热稳定性的聚合物，最常用的是聚硅氧烷（有时误称为硅氧烷）和聚乙二醇，另外还有一类是小的多孔粒子组成的聚合物或沸石(例如氧化铝、分子筛等)。 聚硅氧烷在其用途的多用性、性质的稳定性上都有优良的表现也是目前最为常用的固定相。标准的聚硅氧烷是由许多单个的硅氧烷重复联接构成：每个硅原子与两个功能团相连，功能团的类型和数量决定了固定相总体类型和性质常见的四种功能基团为甲基、氰丙基、三氟丙基和苯基。最基本的聚硅氧烷是由100%甲基取代的。 表3 常用固定液及相应色谱柱 固定相 极性 相应色谱柱 应用 使用温度 100％二甲基聚硅氧烷 非极性 OV-1,OV-101, SE-30,DB-1, HP-1,BP1 常规使用，碳氢化合物，芳香化合物，农药，酚类，除草剂，胺，脂肪酸甲酯 0.1-1.0μm -60℃-340/ 1.0μm -60℃-280/ 5％苯基-95 ％二甲基聚硅氧烷 非极性 SE-54,DB-5, HP-5,BP5 芳香化合物，农药，杀虫剂，药物，碳氢化合物 0.1-1.0μm -60℃-340/ 1.0μm -60℃-280/ 14％氰丙苯基-86％二甲基聚硅氧烷 中等极性 HP-1701,DB-1701,OV-1701,BP-10 农药，杀虫剂，药物 0.25-1.0μm -20℃-280/ 50％苯基-50 ％二甲基聚硅氧烷 中等极性 HP-50,DB-17, OV-17 药物，杀虫剂，乙二醇 40℃-280/ 聚乙二醇 极性 HP-20M (HP-Wax),DB-Wax,BP20 溶剂，醇类，游离酸，芳香化合物 0.25-1.0μm 20℃-260/ 1.0μm 20℃-240/ 4.2 毛细管柱又分为三类： a空心毛细