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克隆策略复习题及答案 一、填空题 1．克隆策略有三层含义：① 采用什么样的技术路线将目的基因中克隆出来 ；② 用什么方法将目的基因同载体连接 ；③ 通过什么方法将体外连接的DNA 分子导入适当的受体进行扩增或表达 。 2．假定克隆一个编码某种蛋白质的基因，必须考虑其表达的三个基本条件： ① 保持正确的可读框 ；② 能够使其转录的启动子 ；③ 具有翻译的起始和终止信号 。 3．现有的基因克隆策略大体上分为四类： 功能克隆 、定位克隆 、表型克隆 、 电子克隆。 4．受体细胞的感受态是 接受外源DNA 的生理状态 。 5．DNA 重组连接的方法大致分为四种：① 黏性末端连接 ；② 平末端连接；③ 同聚物加尾连接 ； ④ 接头/连接子连接。 6．将含有外源基因组一个酶切片段的质粒称之为含有一个 基因组DNA 克隆，各种此类质粒的集合体称之为构建了一个 基因组DNA 文库 。 7．将含有一个mRNA 的DNA 拷贝的克隆称作一个 cDNA 克隆 ，源于同一批RNA 制备物的克隆群则构建了一个 cDNA 文库 。 8．在构建cDNA 克隆之前，可以用 差示杂交 来富集一特殊的核苷酸序列。做法是：用来自于能够产生目的蛋白的细胞mRNA 分子同来自于另一类型细胞 (不产生这种蛋白质，但亲缘关系密切) 的过量mRNA 分子杂交。 9．一旦克隆了一个遗传定位的基因，就可以用 染色体步移 技术来鉴定基