细胞工程-复习学案一轮.docVIP

PAGE PAGE 8 细胞工程学案 考点要求 考点要求 要求级别：Ⅰ 考题分布： (2006天津30(6)).(2006江苏35).(2006重庆31).(2006广东34).(2006全国Ⅰ,3).(2006北京1). (2006江苏生物7).2006广东生物6).(2005广东5). （2004江苏39）. (2004全国二5).(2004广东27).(2004上海8).(2003上海36).(2003江苏21) 知 知 识 网 络 1．细胞工程 植物细胞工程 动物细胞工程 植物组织培养 植物体细胞杂交 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体 胚胎移植 核移植 植物细胞的全能性 2 2.植物组织培养与动物细胞培养 ⑵过程 （ ） 激素、光 离体的植物（ ） （ ） 营养物、激素 （ ） 形成具根、芽的（ ） 植物体 种类：（ ） 种类：（ ） 营养物质种类： （ ） 剪碎、 胰蛋白酶 动物胚胎或（ ） 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 …… （ ） （ ） （ ）培养 （ ）培养 特点：（ ） （ ） ①植物组织培养 ②动物细胞培养 ⑴原理：（ ）和（ ） 应用：（ ） 应用：（ ） 应用：（ ） 应用： ① ② ③ ④ 3 3、植物体细胞杂交 融合的原生质体 杂种细胞 愈伤组织 杂种植物 生出壁 植物A 植物B 原生质体A 去壁 原生质体B 去壁 酶解法（纤维素酶、果胶酶） A、B、 AA、BB AB(筛选） 植物组织培养 物理法 化学法 离心、振荡、 电刺激 聚乙二醇 应用： 4 4、动物细胞融合 单克隆抗体 抗原 效应 B淋巴细胞 杂交瘤细胞 筛选（ ） 细胞融合 免 疫 选特定抗体的细胞群继续培养（体外、体内） 提取 单克隆抗体 骨髓瘤细胞 方法： 特点： 应用： 意义：加快优良种畜的繁殖速度 意义：加快优良种畜的繁殖速度 卵细胞 精子 + 受精卵 试管内 发育 早期 胚胎 移入子宫内 发育 成熟 胚胎 娩出 受精 试管内 幼体 5．胚胎移植 过程 甲动物体细胞核 甲动物体细胞核 乙动物去核卵细胞 组装细胞 生长发育 移核动物 （甲的体细胞克隆） 6．核移植 重难点解析 重难点解析 一、.病毒为什么可以促使细胞融合 体细胞融合的关键是要找到一种能促使细胞融合的促融合剂。在动物细胞的最好促融合剂是仙台病毒。病毒有个特点，它能附着在宿住细胞表面，然后侵入。仙台病毒的优点在于它有若干附着位点，可以同时附着在两个不同的细胞表面。由于病毒体积很少，所以由一个病毒吸附的两个细胞靠得很近，并使细胞膜融合在一起，成为一个杂种细胞。开始时，细胞核可能并不融合，这样就构成了一个所谓的异核体。如果细胞核进一步与融合，就形成了一个真正的杂种细胞。不过这里所用的病毒先要经过灭活，它已不能侵入寄住，但并不丧失吸附的能力. 二、杂种细胞的选择和体细胞杂种的鉴定 （一）融合体的类型 1.未融合细胞：再生植株与亲本相同 2.自体融合：融合结果得到“同核体” 3.异体融合：融合结果得到“异核体”，由于融合形式不同,又分为几种： （1）谐和的细胞杂种：细胞完全融合，具有双亲全套遗传信息（包括胞核、胞质）。再生植株为异源双二倍体。这是最理想的融合。 （2）部分谐和的细胞杂种：细胞完全融合，但由于染色体排斥，细胞分裂过程中，部分染色体被排斥掉。 （甘薯+野生种杂种） （3）异胞质细胞杂种：细胞质来自于双亲，胞核来自于一个亲本，另一个亲本的胞核被排斥。 （4）嵌合细胞杂种：细胞质发生融合，而细胞核未融合，细胞核各自分裂，形成嵌合体，再生植株为嵌合体植株。 （二）杂种细胞的选择 融合处理后，有各种形式的细胞。异核融合细胞的分裂、分化，有的情况下会受抑制，因此，必要时，在培养早期选择杂种细胞，单独培养。并非所有的融合都需要进行杂种细胞的选择，也可在植株再生后再鉴定杂种。 杂种细胞的选择方法： （1）根据形成细胞团的颜色、形状等来判断 （2）IOA处理与培养基相结合进行选择： A亲本用IOA（核失活-碘乙酰胺） 处理，使细胞质不活化，这样A原生质体不能分裂；培养基使用不利于B亲本再生的培养基，这样B原生质体也不能再生。最后能再生的只