2. 真核生物基因组DNA的提取、电泳幻灯片.pptVIP

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  • 2018-09-07 发布于河南
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2. 真核生物基因组DNA的提取、电泳幻灯片.ppt

* 注意事项:教师在实验中到学生中间指导实验。 * 步骤8)时注意:完整基因组DNA有一个物理特性,就是比较粘,因此,如果基因组DNA黏度还在,一般情况下可以认为完整性尚可。 * 实验第三部分:60~80分钟。(3:30~4:00) * 要。 * * 小图为教师做的予实验结果。由于在一个反应体系中有很多条基因组DNA,因此,理论上说,内切酶可以切割出相差一个碱基的DNA片段。 本次实验使用未经酶切的DNA样品电泳,由于片段大,在加样孔附近可看到一条很亮的DNA带。 实验一、真核生物基因组DNA的提取、电泳 掌握Southern blot的原理及基本步骤 掌握人外周血基因组模板DNA的提取技术。 学习DNA琼脂糖凝胶电泳的原理和技术 。 第一部分 :裂解红细胞、蛋白酶k消化 第二部分: 酚氯仿抽提、乙醇沉淀基因组DNA 第三部分: 基因组DNA琼脂糖凝胶电泳 第四部分: 基因组DNA变性,中和及转膜 二、实验内容 三、主要试剂(稍后讲解) 一、 实验目的 四、实验步骤(马上讲解) 1)取0.3ml抗凝血置于1.5ml Eppendorf管中. 2)加入1ml STMT 溶液,充分混匀,静置5min,使其溶血。 3)9,000rpm,离心 3 分钟(统一离心)。 4) 弃上清。弹管底重悬沉淀。 实验第一部分 裂解红细胞、蛋白酶K消化 注意事项: 离心时离

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