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--高生物《细胞工程》课件
原代培养和传代培养 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 无限传代 原代培养 传代培养 多数组织细胞固定在表面生长和分裂 随细胞增多,细胞就会停止分裂增殖 3.动物细胞培养的条件 (1)无菌、无毒的环境 (2)必须的营养物质 (葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、激素、促生长因子、动物血清等。) (3)适宜的温度: 36.5±0.5度 (4)充足的氧气和适宜的酸碱度: O2和CO2(95%空气和5% CO2 ) 4.动物细胞培养与植物组织培养的比较 其他条件 取材 目的 结果 培养基的成分 培养基的物理性质 动物细胞培养 植物组织培养 项目 固体 液体 水、矿质元素、维生素、蔗糖、氨基酸、激素、琼脂等 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等 新的植株或组织 新的细胞系或细胞株 ①植株快速繁殖②脱毒植株的培③人工种子④生产药物、杀虫剂等⑤转基因植物的培育 ①蛋白质生物制品的生产②皮肤移植材料的培育③检测有毒物质④生理、病理、药理学研究 植物幼嫩的部位或花药等 动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织 均为无菌操作,需要适宜的温度、pH等条件 1、概念 将动物的一个细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成为一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体(克隆动物)。 (二) 动物细胞核移植 胚胎细胞核移植: 体细胞核移植: 细胞分化程度低,恢复全能性容易 细胞分化程度高,恢复全能性不容易 2、分类 3体细胞核移植过程 卵细胞 A母绵羊 B母绵羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 早期胚胎 卵裂 C母绵羊子宫 胚胎移植 多莉羊 分娩 妊娠 融合后的卵细胞 1.核移植的受体细胞是什么?处在什么时期? MⅡ中期卵母细胞 诱导方法:物理或化学方法激活受体细胞,完成细胞分裂和发育进程。 思考 2.通过什么手段激活受体细胞,构建重组胚胎? 湖南长郡卫星远程学校 2012年下学期 制作 03 1007 1006 细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过细胞水平或细胞器水平上的操作,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 按操作对象分类 植物细胞工程 动物细胞工程 一、细胞工程的概念 二、细胞工程的原理 动、植物细胞全能性 (1)原因: 生物体的每个细胞都含有发育成完整个体所必需的全部基因。 (2)全能性表现的大小: 受精卵的全能性最大,其次是生殖细胞,体细胞相对较小。 (3)全能性表现与细胞种类有关: 离体的植物体细胞的全能性在一定条件下可充分体现。离体的动物体细胞,全能性受到限制,但其细胞核仍具有全能性,需要借助卵细胞的细胞质才能体现出来。未离体细胞的全能性不能表达,只能在机体调控下定向分化。 (4)细胞的全能性是植物细胞工程技术的理论基础。 离体的植物器官、组织或细胞 愈伤组织 脱分化 过程 植物激素: 细胞分裂素、生长素 外植体 根、芽 植物体 再分化 三、植物组织培养 植物组织培养条件: 含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。 蔗糖为生长、分化的必需成分(提供能量),光促进细胞分化。 四、植物体细胞杂交技术 1. 概念 将不同种的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 2. 过程 四、植物体细胞杂交技术 杂种植株 融合的原生质体AB 再生出细胞壁 脱 分 化 愈伤组织 再 分 化 植物细胞的融合 植物组织培养 植物细胞A 原生质体B 原生质体A 杂种细胞AB 去壁 去壁 人 工 诱 导 植物细胞B 四、植物体细胞杂交技术 3. 成果和未解决的问题 成果: 克服不同生物远缘杂交的障碍,出现自然界没有的新品种。 未解决的问题: 未能让杂种植物按照人们的需要表现出亲代的优良性状。 单克隆抗体等 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 是其他动物细胞工程技术的基础。 五、动物细胞工程常用技术 (一)动物细胞培养 从动物机体中取出相关组织,将它们分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 1.概念 2.动物细胞培养过程 胚胎或幼龄动物的组织器官 2.动物细胞培养过程 胚胎或幼龄动物的组织器官 比老龄动物的组织细胞增殖能力强,有丝分裂旺盛。分化程度越低,繁殖能力越强,越容易培养。 2.动物细胞培养过程 胚胎或幼龄动物的组织器官 剪碎 胰蛋白酶 2.动物细胞培养过程 胚胎或幼龄动物的组织器官 剪碎 胰蛋白酶 动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质,将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。 2.动物细胞培养过程 胚胎或幼龄动物的组织器
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