分析化学第10吸光光度法a.ppt

美国Beckman Coulter 要 点 1、Plank 条件 2、物质的电子结构不同，所能吸收光的波长也不同，这就构成了物质对光的选择吸收基础。 3、在一定的实验条件下，物质对光的吸收与物质的浓度成正比。 吸光定律 c：mol / L 摩尔吸光系数， L · mol –1 · cm -1 K ? ? c：g / L K ? a 吸光系数， L · g –1 · cm -1 §3 光度分析法的设计 3.1 显色反应 3.2 显色条件的选择 3.3 测量波长和吸光度范围的选择 3.4 参比溶液的选择 3.5 标准曲线的制作 3.1 显色反应 待测物质本身有较深的颜色，直接测定；待测物质是无色或很浅的颜色，需要选适当的试剂与被测离子反应生成有色化合物再进行测定，此反应称为显色反应，所用的试剂称为显色剂（color reagent）。 按显色反应的类型来分，主要有氧化还原反应和络合反应两大类，而络合反应是最主要的。 (1) 选择性要好，干扰少，或干扰容易消除。 (2)灵敏度要高，一般要求有色物质的ε应大于104 。 (3)对比度要大。即如果显色剂有颜色，则有色化合物与显色剂的最大吸收波长的差别要大，一般要求??max在60nm以上。 (4)有色化合物的组成要恒定，化学性质要稳定，至少保证在测量过程中溶液的吸光度基本恒定。 一、对显色反应要求 M(被测组分)+R(显色剂) =MR(有色络合物) 二、显色剂 (1)无机显色剂： 许多无机试剂能与金属离子起显色反应，如Cu2+与氨水形成深蓝色的络离子Cu(NH4)42+，SCN-与Fe3+形成红色的络合物Fe(SCN)2+或Fe(SCN)63-等。但是多数无机显色剂的灵敏度和选择性都不高，其中性能较好，目前还有实用价值的有硫氰酸盐、钼酸铵、氨水和过氧化氢等。 (2)有机显色剂：许多有机试剂，在一定条件下，能与金属离子生成有色的金属螯合物(具有环状结构的络合物)。 显色剂中的生色团和助色团 在有机化合物分子中，凡是包含有共轭双键的基团如—N＝N—、—N＝O、对醌基、＝C＝O、＝C＝S等，一般都具有颜色，原因是这些基团中的л电子被光激发时，只需要较小的能量，能吸收波长大于200nm的光，因此，称这些基团为生色团； 某些含有未共用电子对的基团如胺基—NH2，RHN—，R2N—(具有一对未共用电子对)，羟基-OH(具有两对末共用电子对)，以及卤代基—F，—Cl，—Br，—I等，它们与生色基团上的不饱和键互相作用，引起永久性的电荷移动，从而减小了分子的活化能促使试剂对光的最大吸收“红移” (向长波方向移动)，使试剂颜色加深， ε增大，这些基团称为助色团。 有机显色剂示例 A 磺基水杨酸 OO型螯合剂，可与很多高价金属离子生成稳定的螯合物，主要用于测Fe3+。 B 丁二酮肟 NN型螯合显色剂，用于测定Ni2+。 C 1，10-邻二氮菲 NN型螯合显色剂，测微量Fe2+。 D 二苯硫腙 含S显色剂，萃取光度测定Cu2+，Pb2+，Zn2+，Cd2+，Hg2+等。 E 偶氮胂Ⅲ(铀试剂Ⅲ) 偶氮类螯合剂，强酸性溶液中测Th(Ⅳ),Zr(Ⅳ)，U(Ⅳ)等；在弱酸性溶液中测稀土金属离子。 F 铬天青S 三苯甲烷类显色剂，测定Al3+。 G 结晶紫 三苯甲烷类碱性染料，测定Tl3+。 三、多元络合物 多元络合物是由三种或三种以上的组分所形成的络合物。 * 三元混配络合物 金属离子与一种络合剂形成未饱和络合物，然后与另一种络合剂结合，形成三元混合配位络合物，简称三元混配络合物。 *离子缔合物 金属离子先与络合剂生成络阴离子或络阳离子，再与带反电荷的离子生成离子缔合物。主要用于萃取光度法。 * 金属离子-络合剂-表面活性剂体系 金属离子与显色剂反应时，加入某些表面活性剂，可以形成胶束化合物，它们的吸收峰向长波方向移动(红移)， ε增大，而测定的灵敏度显著提高。 * 杂多酸 溶液在酸性的条件下，过量的钼酸盐与磷酸盐、硅酸盐、砷酸盐等含氧的阴离子作用生成杂多酸，作为吸光光度法测定相应的磷、硅、砷等元素的基础。 3.2 显色条件的选择 实验条件包括:溶液酸度，显色剂用量，试剂加入顺序，显色时间，显色温度，有机络合物的稳定性及共存离子的干扰等。 （1）溶液的酸度 M+HR=MR+H+ * 影响显色剂的平衡浓度和颜色 * 影响被测金属离子的存在状态 * 影响络合物的组成 * 由pH与吸光度关系曲线确定pH范围。 （2）显色剂的用量 M(被测组分)+R(显色剂